細胞傳代步驟：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介：
人心臟微血管內皮分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養(yǎng)物質，并帶走代謝的終產物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明，心肌微血管內皮細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。
方法簡介：
公司實驗室分離的人心臟微血管內皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人心臟微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 心臟組織 | 產品貨號 | YS-01X7283 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 內皮細胞樣 |
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品：
大鼠熱休克蛋白40(HSP40)試劑盒 ，英文名： HSP40 ELISA Kit
Mouse vascular endothelial growth factor receptor -3 (VEGFR-3) ELISA Kit 小鼠血管內皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3)試劑盒
RatPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit 大鼠0脂酶A2(PL-A2)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGSTpi(HumanglathioneS-ansferases0ELISAKit人硫轉移酶pi基因
細胞超氧化物陰離子比色法定量試劑盒20次
Rattumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AILR1ELISAKit大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(AIL-R1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠試劑盒 小鼠試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠試劑盒、小鼠試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。
小鼠生長激素釋放肽試劑盒 小鼠生長激素釋放肽試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠生長激素釋放肽試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠生長激素釋放肽試劑盒、小鼠生長激素釋放肽試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。
小鼠生長激素釋放多肽試劑盒 小鼠生長激素釋放多肽試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠生長激素釋放多肽試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠生長激素釋放多肽試劑盒、小鼠生長激素釋放多肽試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。
小鼠損傷分子試劑盒 小鼠損傷分子試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠損傷分子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠損傷分子試劑盒、小鼠損傷分子試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。
ARC1抗體
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 大鼠基質金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒
HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDIELISAKit 人鳥苷酸解離抑制因子(GDI)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Duckcyclicadenosinemonophosphate,cAMP試劑盒鴨環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡試劑盒(針對一甲基)10/20次
MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISAKit小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
非活性雙特異性磷酸酶抗體27抗體
IL6ST重組小鼠 IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CD33 peptide(human 0.5mgCD33 peptide(human) CD33抗原(人)
VCL重組人 VCL / Vinculin 蛋白 Protein
CLEC1B Protein Human 重組人 CLEC1B / CLEC2 蛋白
IL9 Protein Rat 重組大鼠 IL9 / IL-9 蛋白
人心臟微血管內皮細胞CD33 peptide(human 0.5mgCD33 peptide(human) CD33抗原(人)
CLEC1B Protein Human 重組人 CLEC1B / CLEC2 蛋白
IL6ST重組小鼠 IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
IL9 Protein Rat 重組大鼠 IL9 / IL-9 蛋白
VCL重組人 VCL / Vinculin 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
