細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠肺泡巨噬分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。肺泡由單層上皮細胞構成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經多次反復分枝成無數細支氣管,它們的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡。巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得,便于培養,并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養,難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內的白血球,源自單核細胞,而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞,在脊椎動物體內參與非特異性防衛(先天性免疫)和特異性防衛(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細胞,令其對病原體作出反應。肺泡巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍,有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬細胞儲存器官,為結核病的研究提供了重要的材料。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠肺泡巨噬采用機械研磨結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠肺泡巨噬經CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 肺組織 | 產品貨號 | YS-01X7471 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 巨噬細胞樣 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 巨噬細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 (12mM)
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒 ,英文名: LTB4 ELISA Kit
Mouse ierleukin 12 (IL-12/P40) ELISA Kit 小鼠白介素12(IL-12/P40)試劑盒
ELISA 小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon) 進口分裝
CLIAKitfori-PTH(MouseiactParathormone)ELISAKit小鼠全段甲狀旁腺素
通用型非蛋白/游離巰基含量比色法定量試劑盒20次
ELISAKitADP大鼠脂聯素
小鼠白介素23(IL-23)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素2(IL-2)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)試劑盒 96T/48T
1號染色體開放閱讀框144抗體
小鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒
Humanprotocadherin1,PCDH1ELISAKit 人原鈣黏素1(PCDH1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-livercytosolaibodytype1,LC1試劑盒人抗肝細胞胞質1型抗體(LC1)試劑盒規格:96T/48T
植物內質網粗提分離試劑盒10次
Humanvanillylmandelicacid,VMAELISAKit人垂草扁桃酸(VMA)試劑盒規格:96T/48T
磷酸化非受體酪激酶c-Abl抗體
CA8重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白 Protein
CD200受體1(CD200R1)重組蛋白 Recombinant CD200 Receptor 1 (CD200R1)
IP6K1重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白
FCAR Protein Rat 重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白
小鼠肺泡巨噬細胞脯氨酰羧肽酶(PRCP)重組蛋白 Recombinant Prolylcarboxypeptidase (PRCP)
EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白
CCL3重組小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein
SERPINC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SerpinC1 / AntithrombinIII / ATIII 蛋白
CD3D & CD3E重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取