細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠虹膜色素上皮分離自眼球虹膜組織;虹膜是眼睛構造的一部分,屬于眼球中層,位于血管膜的前部;在睫狀體前方虹膜,中心有一圓形開口,稱為瞳孔,猶如相機當中可調整大小的光圈,內含色素決定眼睛的顏色。日間光線較為強烈時,虹膜會收蹜,只使一小束光線穿透瞳孔,進入眼睛;當進入黑暗環境中,虹膜就會往后退縮,使瞳孔變大,讓更多的光線進入眼睛,多數的脊椎動物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮細胞(IPE)是虹膜重要結構組成細胞之一,位于虹膜組織的后面,和視網膜色素上皮細胞(RPE)同樣起源于神經外胚葉層,可能具有相似的生物學功能,因此對IPE的研究將為防治因RPE結構或功能異常而導致的眼底病提供新思路。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠虹膜色素上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠虹膜色素上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 眼球 | 產品貨號 | YS-01X7380 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠心營養素樣細胞因子1(CLCF1)試劑盒 ,英文名: CLCF1 ELISA Kit
Mouse heat shock protein 70 (HSP-70) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒
MouseFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 小鼠血纖蛋白原降解產物(FDP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanai-macrophageaibodyELISAKit人抗巨噬細胞抗體
細胞FLT3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitGRH大鼠促生長激素釋放激素
小鼠GRO(mouse GRO) 作用: ELISA
小鼠神經膠質細胞衍化營養因子(mouse GDNF) 作用: ELISA
小鼠生長因子(mouse GH) 作用: ELISA
小鼠心肌轉錄因子3(mouse GATA3) 作用: ELISA
生發中心激酶樣激酶抗體
小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human growth hormone releasing factor (GH-RF) ELISA Kit 人生長激素釋放因子(GH-RF)試劑盒
Humahymopein,TP-5ELISAKit 人五肽(TP-5)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-rubellavirusIgGaibody,ai-RVIgG試劑盒人抗風疹病毒IgG抗體(ai-RVIgG)試劑盒規格:96T/48T
植物細胞周期G1期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
Humaubularbasememembraneaibogy,TBMELISAKit人抗腎小管基底膜抗體(TBM)試劑盒規格:96T/48T
AF488標記人CD16單克隆抗體
SMAD3重組小鼠 Smad3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
高遷移率族蛋白1(HMG1)重組蛋白 Recombinant High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
SHPK重組人 CARKL / SHPK 蛋白 Protein
FAM45A Protein Human 重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白
CD200R1L Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200RLa 蛋白
小鼠虹膜色素上皮細胞高遷移率族蛋白1(HMG1)重組蛋白 Recombinant High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
FAM45A Protein Human 重組人 CAMK1 / CaMKI-alpha 蛋白
SMAD3重組小鼠 Smad3 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CD200R1L Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200RLa 蛋白
SHPK重組人 CARKL / SHPK 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取