細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠神經小膠質分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質細胞是神經膠質細胞的一種,相當于腦和脊髓中的巨噬細胞,是中樞神經系統(CNS)中的道也是主要的一道免疫防線。小膠質細胞大約占大腦中的神經膠質細胞的20%,小膠質細胞不停地清除著中樞神經系統中的損壞的神經,斑塊及感染性物質。無數臨床上和理學研究表明激活的小膠質細胞在神經退化類疾病的發病機理中起到十分重要的作用,如帕金森病、多發性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質細胞會引起神經毒性。它們是促炎因子和氧化應激的重要來源,如腫瘤壞死因子(TNF),一氧化氮,白介素等有神經毒性的物質。神經小膠質細胞的主要功能:①神經膠質出現在大腦發育早期向成熟階段轉化的過程中;②當程序性細胞死亡時,或在大腦發育的過程中,中樞神經系統受損或受到病理損壞時,神經膠質可做為大腦的巨噬細胞;③膠質細胞能在Ⅱ類組織相容性復合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原,能進行Fc介導的巨噬作用,并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠神經小膠質采用酶消化法結合差速貼壁法,在培養基營養缺失數天后經搖床震蕩收集脫落細胞制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠神經小膠質經CD11b免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 腦組織 | 產品貨號 | YS-01X7356 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 (12mM)
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠血小板因子4(PF4)試劑盒 ,英文名: PF4 ELISA Kit
Mouse coagulation factor VIII related aigen (F VIII -Ag) ELISA Kit 小鼠Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)試劑盒
Mousebasicfibroblastgrowthfactor9,bFGF-9ELISAKit 小鼠堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHumanCollagenaseIELISAKit人膠原酶I
細胞CDK2/CYCLINE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitHGF大鼠肝細胞生長因子
兔子血栓調節蛋白(TM)ELISAKit ELISA.
兔子血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISAKit ELISA.
兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISAKit ELISA.
兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISAKit ELISA.
核苷酸結合蛋白3樣蛋白抗體
小鼠表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒
Rat fractalkine (FK) ELISA Kit 大鼠趨化因子(FK)試劑盒
Humanfocaladhesionkinase,FAKELISAKit 人黏著斑激酶(FAK)試劑盒 進口分裝
Humanbrainnaiureticpeptide,BNP試劑盒人腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒
植物組織膜性囊泡(vacuole)分離試劑盒20次
HumanSquamousCellCarcinomaAigen2,SCCAg2ELISAKit人鱗狀上皮細胞癌抗原2(SCCAg-2)試劑盒
腫瘤抑制基因抗體
CD83重組食蟹猴 CD83 蛋白 Protein
MAGE-1 黑色素瘤相關 0.5mgMAGE-1 黑色素瘤相關
IL21重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白 Protein
GABARAPL2 Protein Human 重組人 GATE-16 / GABARAPL2 蛋白 (His 標簽)
ITK Protein Mouse 重組小鼠 ITK Kinase 蛋白 (aa 351-619, His & GST 標簽)
小鼠神經小膠質細胞MAGE-1 黑色素瘤相關 0.5mgMAGE-1 黑色素瘤相關
GABARAPL2 Protein Human 重組人 GATE-16 / GABARAPL2 蛋白 (His 標簽)
CD83重組食蟹猴 CD83 蛋白 Protein
ITK Protein Mouse 重組小鼠 ITK Kinase 蛋白 (aa 351-619, His & GST 標簽)
IL21重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取