細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠腎小球上皮分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物,同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質,如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內環境的穩定,使新陳代謝得以正常進行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球上皮細胞是由間充質細胞分化發育、襯貼于腎小球血管腔的單層扁平上皮細胞,是腎小球的固有細胞之一,也是構成腎小球濾過膜的重要組成部分。腎小球上皮細胞的正常結構和功能是腎單位濾過及腎小球微環境穩定的重要保障。腎小球濾過膜的外層為上皮細胞層,厚約40nm,腎小球上皮細胞是腎小囊的臟層上皮細胞,貼附于腎小球血管外側基底膜上。上皮細胞又稱足細胞,足細胞的不規則突起為足突,其間有許多狹小間隙,血液經濾過膜過濾入腎小球囊。腎小球上皮細胞可通過合成和分泌腎上腺髓質肽抑制系膜細胞增殖,腎上腺髓質肽作為一種重要的旁分泌因子,可保持腎小球微環境穩定,并參與腎小球的炎癥過程。體外培養的腎小球上皮細胞對各型腎小球腎炎具有重要的研究價值。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腎小球上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腎小球上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 腎組織 | 產品貨號 | YS-01X7623 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)試劑盒 ,英文名: ENA78 ELISA Kit
Mouse cardioophin 1 (CT-1) ELISA Kit 小鼠心肌營養素1(CT-1)試劑盒
RatFibrinogen,FbgELISAKit 大鼠血纖蛋白原(Fbg)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HAVIgG抗-HAV(總)競爭法一步法
細胞半胱蛋白酶-5(CASPASE-5)活性熒光定量試劑盒20次
RatVitaminB12,VB12ELISAKit大鼠B12(VB12)試劑盒規格:96T/48T
兔子內皮抑素試劑盒 兔子內皮抑素試劑盒 規格型號:96T/48T 兔子內皮抑素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子內皮抑素試劑盒、兔子內皮抑素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
兔子甲狀腺素試劑盒 兔子甲狀腺素試劑盒 規格型號:96T/48T 兔子甲狀腺素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子甲狀腺素試劑盒、兔子甲狀腺素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
兔子Ⅱ試劑盒 兔子Ⅱ試劑盒 規格型號:96T/48T 兔子Ⅱ試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子Ⅱ試劑盒、兔子Ⅱ 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
兔子受體試劑盒 兔子受體試劑盒 規格型號:96T/48T 兔子受體試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子受體試劑盒、兔子受體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
1號染色體開放閱讀框131抗體
小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat heat shock protein 70 (HSP-70) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒
Humanphosphoenolpyruvatecarboxykinase,PCKELISAKit 人0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCaldesmon,CALD試劑盒人鈣調結合蛋白(CALD)試劑盒規格:96T/48T
中性紅細胞繁殖比色法定量試劑盒500次
HumansolublePhospholipaseA2,sPL-A2ELISAKit人可溶性0脂酶A2(sPL-A2)試劑盒規格:96T/48T
促腎上腺皮質激素釋放激素結合蛋白抗體
IL1RL1重組人 IL1RL1 / DER4 蛋白 Protein
絲蛋白酶1(PRSS1)重組蛋白 Recombinant Protease, Serine 1 (PRSS1)
KIRREL重組人 KIRREL / NEPH1 / KIRREL1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
GCK Protein Human 重組人 Glucokinase / GCK 蛋白
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
小鼠腎小球上皮細胞絲蛋白酶1(PRSS1)重組蛋白 Recombinant Protease, Serine 1 (PRSS1)
GCK Protein Human 重組人 Glucokinase / GCK 蛋白
IL1RL1重組人 IL1RL1 / DER4 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
KIRREL重組人 KIRREL / NEPH1 / KIRREL1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取