細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠腎小球系膜分離自腎小球組織;腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內,微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球系膜是位于腎小球毛細血管袢之間的一種特殊間充質,由系膜細胞和系膜基質組成。腎小球系膜細胞是腎小球內非常活躍的細胞,具有分泌細胞基質、產生細胞因子、吞噬和清除大分子物質及類似平滑肌細胞收縮的功能。腎小球系膜細胞增生和基質的過多產生是多種腎小球腎炎的主要病理表現。腎小球系膜細胞的培養是研究系膜擴張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。系膜細胞的主要作用可能有:①收縮作用,入球小動脈和出球動脈的收縮作用受系膜細胞的調節,以影響毛細血管袢的內壓和濾過率;②支持作用,它填充于毛細血管袢之間,支持毛細血管的位置;③吞噬作用,能吞噬被阻留在基膜內的大分子物質和蛋白質;④分泌腎素,在腎缺血或免疫復合物沉積時,系膜細胞增生且分泌腎素。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腎小球系膜采用機械研磨法結合不同孔徑不銹鋼網篩過濾后使用膠原酶消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腎小球系膜經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 腎組織 | 產品貨號 | YS-01X7225 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠神經蛋白聚糖(NCAN)試劑盒 ,英文名: NCAN ELISA Kit
Mouse cardiac oponin I (cTn- I) ELISA Kit 小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒
RatMyosinELISAKit 大鼠肌球蛋白(Myosin)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHB-Beta(HumanBeta-subunitsofhemoglobin)ELISAKit人血紅蛋白β亞基
細胞半胱蛋白酶-4(CASPASE-4)活性熒光定量試劑盒20次
RatVitaminC,VCELISAKit大鼠C(VC)試劑盒規格:96T/48T
兔子內皮抑素試劑盒 兔子內皮抑素試劑盒 規格型號:96T/48T 兔子內皮抑素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子內皮抑素試劑盒、兔子內皮抑素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
兔子甲狀腺素試劑盒 兔子甲狀腺素試劑盒 規格型號:96T/48T 兔子甲狀腺素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子甲狀腺素試劑盒、兔子甲狀腺素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
兔子Ⅱ試劑盒 兔子Ⅱ試劑盒 規格型號:96T/48T 兔子Ⅱ試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子Ⅱ試劑盒、兔子Ⅱ 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
兔子受體試劑盒 兔子受體試劑盒 規格型號:96T/48T 兔子受體試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子受體試劑盒、兔子受體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
17號染色體開放閱讀框77抗體
小鼠白介素7(IL-7)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human melatonin (MT) ELISA Kit 人褪黑素(MT)試劑盒
Humanurokinase,UKELISAKit 人(UK)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAP試劑盒人牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒規格:96T/48T
干細胞熒光定性試劑盒20次
Humansolublemyosinheavychain1,sMHC-1ELISAKit人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)試劑盒規格:96T/48T
次黃磷酸核糖基轉移酶1單克隆抗體
IGFBP3重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 Protein
Melamine/OVA(ovalbumin 5mgMelamine/OVA(ovalbumin) 三聚胺與雞卵白蛋白偶聯物
AK4重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
GCSH Protein Human 重組人 GCSH 蛋白
CD24 Protein Mouse 重組小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 (Fc 標簽)
小鼠腎小球系膜細胞Melamine/OVA(ovalbumin 5mgMelamine/OVA(ovalbumin) 三聚胺與雞卵白蛋白偶聯物
GCSH Protein Human 重組人 GCSH 蛋白
IGFBP3重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 Protein
CD24 Protein Mouse 重組小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 (Fc 標簽)
AK4重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取