小鼠腎臟巨噬細胞

| 商品屬性：

| 細胞介紹：

小鼠腎臟巨噬分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。

| 方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠腎臟巨噬采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

| 質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠腎臟巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

| 培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 巨噬細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 （12mM）

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

| 細胞培養(yǎng)操作：

1）復蘇細胞：將含有細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

| 注意事項：

1. 收到非紅系有核細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導致細胞出現(xiàn)問 題，責任由客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1711(Sf9)細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細胞僅供科研使用。

| 公司正在出售的產(chǎn)品

大鼠上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)試劑盒 ，英文名： CDHE ELISA Kit

Mouse cardiac anscription factor GATA4 ELISA Kit 小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 試劑盒

RatSomatostatin,SSELISAKit 大鼠(SS)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHAMA(Humanaimousaibody)ELISA人抗鼠抗體

細胞半胱蛋白酶-6(CASPASE-6)活性比色法定量試劑盒20次

RatVitaminA,VAELISAKit大鼠A(VA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔子腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒   96T/48T

兔子腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒   96T/48T

兔子內(nèi)皮抑素(ES)試劑盒   96T/48T

兔子內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒   96T/48T

1號染色體開放閱讀框51抗體

小鼠白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒

Humanierleukieceptorassociatedkinase,IRAKELISAKit 人白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancalmodulin,CAM試劑盒人鈣調(diào)素(CAM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組逆轉(zhuǎn)錄病毒感染試劑盒20次

HumanSolubleLectin-likeoxidizedlowdensitylipoproteieceptor-1,sLOX-1ELISAKit人可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大腦蛋白1抗體

KDR重組大鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 (Fc 標簽) Protein

Estradiol/BSA 雌二醇偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mgEstradiol/BSA 雌二醇偶聯(lián)牛血清白蛋白

CDKL2重組人 CDKL2 蛋白 Protein

GDNF Protein Human 重組人 GDNF 蛋白

TNFRSF1B Protein Mouse 重組小鼠 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白

小鼠腎臟巨噬細胞Estradiol/BSA 雌二醇偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mgEstradiol/BSA 雌二醇偶聯(lián)牛血清白蛋白

GDNF Protein Human 重組人 GDNF 蛋白

KDR重組大鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 (Fc 標簽) Protein

TNFRSF1B Protein Mouse 重組小鼠 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白

CDKL2重組人 CDKL2 蛋白 Protein