細胞簡介：

小鼠腎足突分離自腎組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。足細胞（podocyte）即腎小囊臟層上皮細胞，它附著于腎小球基底膜（GBM）的外側，連同GBM和毛細血管內皮一起構成了腎小球血液濾過屏障。足細胞特殊的解剖位置，使得其體內研究較為困難；又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞，體外培養的原代細胞不能增殖。足細胞呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，又稱足突（FP），呈指狀交叉復蓋于GBM外表面，并通過黏附分子和蛋白多糖分子與GBM相連。足細胞在正常情況下可以分泌GBM的主要組成成分，IV型膠原和纖維連接蛋白（FN）；在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解GBM作用的基質金屬蛋白酶（MMPs）和組織蛋白酶，從而在GBM的代謝平衡中發揮重要作用。足細胞之間鄰近的足突相互交替，形成了許多30-40nm的裂孔，孔上覆蓋一層厚4-6nm的裂孔隔膜，即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統的后屏障，對于維持腎小球濾過屏障結構與功能完整性發揮關鍵作用。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠腎足突采用機械研磨過不同孔徑不銹鋼網篩結合膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠腎足突經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品：

大鼠糖原合酶激酶3β(GSK3β)試劑盒 ，英文名： GSK3β ELISA Kit

Mouse carbonic anhydrase 2 (CA-2) ELISA Kit 小鼠酶2(CA-2)試劑盒

RatFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 大鼠游離睪酮(F-TESTO)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHMGCS1(Human3-hydroxy-3-methylglaryl-CoenzymeAsyhase1)ELISAKit人3-羥基-3-甲基戊二酰合酶1

細胞PKCη激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitFlt3大鼠FMS樣酪激酶3

兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子內皮抑素(ES)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子內皮素1(ET-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子免疫球蛋白G(IgG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

嗅覺受體5AS1抗體

小鼠白介素5(IL-5)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human dehydroepiandrosterone (DHEA) ELISA Kit 人脫氫表雄酮(DHEA)試劑盒

Humanspleeyrosinekinase,SykELISAKit 人脾臟酪激酶(Syk)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancalnexin,CNX試劑盒人鈣聯蛋白(CNX)試劑盒規格：96T/48T

重組逆轉錄病毒感染試劑盒20次

Humansolubleierleukin-2receptor，IL-2sRαELISAKit人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)試劑盒規格：96T/48T

Notch1蛋白抗體

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase 0.5mgPLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) 型纖溶酶原激活因子(多肽)

CDK1重組人 CDC2 Kinase / CDK1 蛋白 (GST 標簽) Protein

GFER Protein Human 重組人 GFER / ALR 蛋白

FGF1 Protein Human 重組人 aFGF / FGF1 蛋白

小鼠腎足突細胞TRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 0.5mgTRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) 壞死因子相關凋亡誘導配體/凋亡素2配體抗原

GFER Protein Human 重組人 GFER / ALR 蛋白

GFP重組水母 GFP 蛋白 Protein

IL32 Protein Human 重組人 Interleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 標簽)

AMICA1重組人 JAML / AMICA 蛋白 Protein