| 商品屬性:
組織來源 | 椎間盤組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | YS-01X7456 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
| 細胞介紹:
小鼠椎間盤髓核分離椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,分為中央部的髓核,富于彈性的膠狀物質(zhì);周圍部的纖維環(huán),由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負荷。髓核,是乳白色半透明膠狀體,富于彈性,為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%,即使到了老年,其含水量也在70%上下。髓核在出生時體積大而松散,位于椎間盤的中央,至成年時位置移至椎間盤的中后部;在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨,隨著年齡的增長,髓核中的蛋白多糖解聚增多,水分逐漸減少,膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。
| 方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
| 質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠椎間盤髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
| 培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
| 細胞培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 公司正在出售的產(chǎn)品
大鼠補體C5a(C5a)試劑盒 ,英文名: C5a ELISA Kit
Mouse alpha 2 aiplasmin (alpha 2-AP) ELISA Kit 小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)試劑盒
ELISA 小鼠促紅細胞生成素(mouse EPO) 進口分裝
CLIAKitforKLK8(Humanurokinase-typeplasminogenactivator)ELISAKit人8
通用型鮑氏志賀菌Shigellaboydii試劑盒20次
ELISAKitHD大鼠組織蛋白去乙酰化酶
兔兒茶酚胺(CA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔交聯(lián)物(PY)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔交聯(lián)物(PY)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISAKit ELISA. 96T/48T
SGTB蛋白抗體
小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat iercellular adhesion molecule 2 (ICAM-2/CD102) ELISA Kit 大鼠細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒
Humanangiotensinogen,aGTELISAKit 人血管緊張素原(aGT)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCompleme7,C7試劑盒人補體7(C7)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織BMK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)試劑盒規(guī)格:96T/48T
降鈣素受體抗體
IL12RB2重組小鼠 IL12RB2 / IL12R-beta 2 蛋白 Protein
Apo J/Clusterin- Alpha/ Beta(Apolipoprotein J 0.5mgApo J/Clusterin- Alpha/ Beta(Apolipoprotein J) 凝聚素α/β抗原
SHH重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 198-462, His 標簽) Protein
REG4 Protein Rat 重組大鼠 REG4 蛋白 (Fc 標簽)
小鼠椎間盤髓核細胞Apo J/Clusterin- Alpha/ Beta(Apolipoprotein J 0.5mgApo J/Clusterin- Alpha/ Beta(Apolipoprotein J) 凝聚素α/β抗原
HTRA2 Protein Human 重組人 HTRA2 / OMI 蛋白
IL12RB2重組小鼠 IL12RB2 / IL12R-beta 2 蛋白 Protein
REG4 Protein Rat 重組大鼠 REG4 蛋白 (Fc 標簽)
SHH重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 198-462, His 標簽) Protein
| 注意事項:
1. 收到非紅系有核細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子 等,確保細胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問 題,責(zé)任由客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng),待ATCC CRL-1711(Sf9)細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián) 系,告知細胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用