細胞簡介：
豬成骨分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié)，起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部，內(nèi)有顱腔，容納腦，共8塊。面顱為顱的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu)，構(gòu)成面部的支架，共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞，負責骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建，骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區(qū)域，分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì)，分泌蛋白酶消化骨基質(zhì)，形成骨吸收陷窩；其后，成骨細胞移行至被吸收部位，分泌骨基質(zhì)，骨基質(zhì)礦化而形成新骨；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關鍵。成骨細胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細胞學基礎，也是藥物篩選、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。
方法簡介：
公司實驗室分離的豬成骨采用先用短時間消化、后用膠原酶反復消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的豬成骨經(jīng)ALP染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 顱骨組織 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7025 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 梭形、多角形 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代步驟：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠原激活蛋白激酶14(MAPK14)試劑盒 ，英文名： MAPK14 ELISA Kit
Mouse advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)試劑盒
Ratadiponectin,ADPELISAKit 大鼠脂聯(lián)素(ADP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHHCII(umanheparincofactorII)ELISAKit人肝素輔因子Ⅱ
細胞S6KINASE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCⅠCP大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽
兔白介素-18(rabbit IL-18) 作用： ELISA
兔免疫球蛋白G(rabbit IgG) 作用： ELISA
兔免疫球蛋白M(rabbit IgM) 作用： ELISA
兔免疫球蛋白E(rabbit IgE) 作用： ELISA
磷酸化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族ets1抗體
小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat cyclin D3 (Cyclin-D3) ELISA Kit 大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)試劑盒
HumanNandrolonePhenylpropionate,NPELISAKit 人苯諾龍/苯去(NP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanconcanavalinA,ConA試劑盒人刀A(ConA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織CDK5/P25激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanProteinase3Aibody,PR3AbELISAKit人蛋白酶3抗體(PR3Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T
信號通路Wnt3a抗體
GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype C, strain 92BR025) Protein
Thioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原 0.5mgThioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原)
IL7R重組人 IL7RA / CD127 蛋白 Protein
ICAM5 Protein Human 重組人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (Fc 標簽)
HRG Protein Human 重組人 HPRG / HRG 蛋白
豬成骨細胞Thioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原 0.5mgThioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原)
ICAM5 Protein Human 重組人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (Fc 標簽)
GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype C, strain 92BR025) Protein
HRG Protein Human 重組人 HPRG / HRG 蛋白
IL7R重組人 IL7RA / CD127 蛋白 Protein
