"制霉素檢定培養(yǎng)基

2010版中國藥典培養(yǎng)基

250g

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按理化性質和生物學功能分類：
　　按理化性質和生物學功能，可將其分為IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五類。
　　IgM抗體是免疫應答中首先分泌的抗體。它們在與抗原結合后啟動補體的級聯(lián)反應。它們還把入侵者相互連接起來，聚成一堆便于巨噬細胞的吞噬；
　 IgG抗體激活補體，中和多種毒素。IgG持續(xù)的時間長，是*能在母親妊娠期穿過胎盤保護胎兒的抗體。他們還從乳腺分泌進入初乳，使新生兒得到保護；
　　IgA抗體進入身體的黏膜表面，包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜，中和感染因子。還可以通過母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中，是在母乳中含量zui多，zui為重要的一類抗體；
　　IgE抗體的尾部與嗜堿細胞、肥大細胞的細胞膜結合。當抗體與抗原結合后，嗜堿細胞與肥大細胞釋放組織胺一類物質促進炎癥的發(fā)展。這也是引發(fā)速發(fā)型過敏反應的抗體；
　　IgD抗體的作用還不太清楚。它們主要出現(xiàn)在成熟的B淋巴細胞表面上，可能與B細胞的分化有關。
（IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發(fā)現(xiàn)，分子量為175kD，主要由扁桃體、脾等處漿細胞產生，人血清中IgD濃度為3～40μg/ml,不到血清總Ig的1%，在個體發(fā)育中合成較晚。IgD鉸鏈區(qū)很長，且對蛋白酶水解敏感，因此IgD半衰期很短，僅2.8天。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚。在B細胞分化到成熟B細胞階段，除了表達SmIgD，抗原刺激后表現(xiàn)為免疫耐受。成熟B細胞活化后或者活化后或者變成記憶B細胞時，SmIgD逐漸消失。）
抗體的功能：
　　抗體的主要功能是與抗原（包括外來的和自身的）相結合，從而有效地清除侵入機體內的微生物、寄生蟲等異物，抗體（antibody）是一種應答抗原產生的、可與抗原特異性結合的蛋白質。每種抗體與特定的抗原決定基結合。這種結合可以使抗原失活，也可能無效但有時也會對機體造成病理性損害，如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的產生，對人體可造成危害。
生物活性：
　　（1）特異性結合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 　
　（2）激活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
　　（3）結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，產生不同的疚，參與免疫應答。
　　（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
　　（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺激機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
　　（6）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。
　　（7）通過與細胞Fc受體結合發(fā)揮多種生物效應 　　①調理作用 　　IgG、IgM的Fc段與吞噬細胞表面的FcγR、FcμR結合，增強其吞噬能力，通常將抗體促進吞噬細胞吞噬功能的作用稱為抗體的調理作用 （opsonization）。 　　②發(fā)揮抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用。
抗體的特異性鑒定 ：
抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力。抗體的特異性高，它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線，計算各自的結合率，求出各自在 IC50時的濃度，并按下列公式計算交叉反應率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管，而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時，表示 這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為 0，即該血清的特異性較好。
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟：
　　1、制備抗原。 　
　2、選擇實驗動物。
　　3、動物免疫。 　
　4、試取血進行測試，看看是否成功免疫。
　　5、如果成功免疫，殺死實驗動物，采集全部血清。
　　6、純化出抗體。 　
　7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
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