基礎支原體半流體培養(yǎng)基
絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在*(BSS)基礎上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應用的培養(yǎng)基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包括非必須氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規(guī)含有無機鹽和代謝添加劑(例如核苷酸)。MEM/F12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2,形成神經(jīng)生物學zui通用的培養(yǎng)基。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基——DMEM,現(xiàn)應用于快速生長的細胞,同MEM含有相同的營養(yǎng)成分,但濃度高出2~4倍。選擇某種培養(yǎng)基,應仔細了解成分表,應知道大多數(shù)情形下培養(yǎng)基都有不足。例如,有些培養(yǎng)基在氨基酸中包括有*,而這種培養(yǎng)基雖廣泛用于神經(jīng)生物學領域,但它對某些對*敏感的可能有細胞外毒性損傷的神經(jīng)元而言,則并非*選擇,特別是如果神經(jīng)元生長在缺乏膠質(zhì)的環(huán)境中時。F12中含有*,據(jù)報道也有神經(jīng)毒效應。
支原體半流體培養(yǎng)基制備方法:
1. 培養(yǎng)同源細胞(未克隆前時的同一細胞)至半?yún)R合狀態(tài)時,更換一次培養(yǎng)液,再繼續(xù)培養(yǎng)24~48小時后,吸出所有培養(yǎng)液。
2. 離心:3000~4000/分離心10分鐘,吸取上清液。
3. 濾過:再經(jīng)直徑0.22μm濾孔的濾膜過濾,低溫凍存貯備用;用時取1分適應培養(yǎng)基+2培養(yǎng)基混合使用。
生長因子絕大多數(shù)哺乳類胚胎神經(jīng)元有嚴格的營養(yǎng)要求,若不能提供適宜的生長因子或合適的因子組分,將會使絕大多數(shù)神經(jīng)元在體外培養(yǎng)的數(shù)天中死亡。解決這一問題有兩條思路,一是讓培養(yǎng)細胞提供自己的營養(yǎng)因子,二是在中加入純的生長因子。如果細胞混合物能在高密度時生長,所需的生長因子便會積累到可觀的數(shù)值,尤其當培養(yǎng)基很少變化時。若某種細胞混合物生長時有很少的營養(yǎng)需求,可保持培養(yǎng)基在一段時間里不作任何變動,以使營養(yǎng)(生長)因子積累,而zui后促使所需要的細胞類型能夠生長。但是,這種對營養(yǎng)(生長)因子自身倚賴性亦有弊端,因為通常在混合細胞群體中細胞很難有同比例增殖,某些細胞會因生長條件的貧乏而受限制。另外,這種方法只能進行相當高密度的細胞培養(yǎng)。因為培養(yǎng)基的條件在細胞的較低密度時變的不夠有效。不過某些時候純化神經(jīng)元群體的低密度培養(yǎng)可用條件培養(yǎng)基(經(jīng)過了高密度培養(yǎng))進行,或在膠質(zhì)上生長的神經(jīng)元所用過的培養(yǎng)基來支持。
滿足神經(jīng)元營養(yǎng)需求的第二條途徑是向培養(yǎng)基中加入生長因子。通常用于組培的通用適宜因子是神經(jīng)生長因子NGF。不過,只有少數(shù)對這種蛋白質(zhì)有反應的細胞類型的細胞才能生長。
相關產(chǎn)品如下:hz0032 豬骨髓間質(zhì)干細胞,Pig MSC細胞
hz0033 豬睪丸細胞系 ST細胞
hz0034 豬肺泡巨噬細胞,3D4/21細胞
hz0035 豬鼻甲黏膜成纖維細胞,PT-K75細胞
hz0036 皺褶青霉
hz0037 中華根霉
hz0038 中國倉鼠體細胞,R 1610(細胞
hz0039 中國倉鼠腎細胞(二氫*還原酶缺陷型) CHO/dhFr-細胞
hz0040 中國倉鼠卵巢細胞,CTLA4 Ig-24細胞
hz0041 中國倉鼠卵巢細胞,CHO細胞,
hz0042 中國倉鼠肺細胞,V79細胞
hz0043 中國倉鼠肺細胞,V79-4細胞
hz0044 中國倉鼠肺細胞,CHL細胞
hz0045 中國倉鼠肺細胞,CHL/IU [ CHL-11 ]細胞
hz0046 中國倉鼠二氫*還原酶缺陷細胞,CHO/dhFr-細胞
hz0047 中國倉鼠倉鼠卵巢細胞亞株 CHO-K1細胞
hz0048 中國倉鼠倉鼠肺細胞,R1610細胞
hz0049 中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤 MR1細胞,
hz0050 致病性大腸埃希氏菌
hz0051 植物乳桿菌
hz0052 正常小鼠睪丸Sertoli細胞,TM4細胞
hz0053 正常小鼠睪丸Leydig細胞,TM3細胞
hz0054 正常人肝細胞,L-02細胞
hz0055 正常大鼠腎細胞,NRK細胞
hz0056 整合SV40 基因的乳腺上皮細胞,HBL-100細胞
hz0057 赭曲霉
hz0058 赭綠青霉
hz0059 沼澤紅假單胞菌
hz0060 張氏肝細胞,HeLa [ Chang Liver ]細胞
hz0061 粘質(zhì)沙雷氏菌