上海閎巨優(yōu)惠供應(yīng)牛甲狀腺素(T4)ELISA分析試劑盒說明書，并提供試劑盒價(jià)格、用途、規(guī)格、實(shí)驗(yàn)原理、說明書、相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作等詳細(xì)信息。閎巨牛甲狀腺素(T4)ELISA分析試劑盒說明書等各種ELISA試劑盒均采用的是定量夾心酶聯(lián)免疫技術(shù)。抗體具體為FGF6已經(jīng)被預(yù)先涂到微孔板。標(biāo)準(zhǔn)和樣品吸入井和任何FGF6目前被綁定的固定化抗體。*共軛的抗體特異性FGF6除去任何未結(jié)合的物質(zhì)后，加入到孔中。抗*蛋白共軛的辣根過氧化物酶（HRP）的洗滌后，加入到孔中。經(jīng)過洗滌，以除去任何未結(jié)合的抗*蛋白的酶試劑，底物溶液加入到孔中，顯色成比例的量的初始步驟中的約束的FGF6。彩色顯影被停止并測(cè)量的顏色的強(qiáng)度。
此種方法ELISA試劑盒，具有較高的靈敏度和特異性好，檢測(cè)鼠標(biāo)FGF6。觀察鼠標(biāo)FGF6和類似物之間無顯著交叉反應(yīng)或干擾。
【操作步驟】
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加*40μL；
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
【結(jié)果判斷】
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
【試劑盒性能】
1. 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。
2. 靈敏度：zui低檢測(cè)濃度小于1.0 ng/L。
3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6個(gè)月
【ELISA試劑盒組成部分】
試劑盒組成 | 48 孔配置 | 96 孔配置保存 |
說明書 | 1份 |
|
封板膜 | 2 片（48） | 2 片（96） |
密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) |
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 225nmol/L 0.5ml×1 瓶 | 0.5ml×1 瓶 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 | 1.5ml×1 瓶 |
酶標(biāo)試劑 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 瓶 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 瓶 |
顯色劑A液 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 瓶 |
顯色劑B液 | 3 ml×1 瓶 | 6 ml×1 瓶 |
終止液 | 3ml×1 瓶 | 6ml×1 瓶 |
濃縮洗滌液 | （20ml×20 倍）×1 瓶 | （20ml×30 倍）×1 瓶 |
【注意事項(xiàng)】
⑴ 嚴(yán)格按照牛甲狀腺素(T4)ELISA分析試劑盒說明書說明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。
⑵ 加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí)，要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。
(3)封板溫育時(shí)，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(4)用洗板機(jī)洗板時(shí)，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(5)合理安排檢測(cè)量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
(6)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
(9)應(yīng)保證C清潔，整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。從而提高檢測(cè)的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
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