即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次實驗方法產品介紹：

即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次實驗方法產品及特點:

本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶，內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物（前兩種本試劑盒提 供）。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意：隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則改成 25℃ 5 分鐘）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含標記 dNTP，本試劑不提供）。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘（但如果使用隨機引物，需要先 25℃保溫 10 分鐘，然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上，電泳一般能出現 1.1Kb 的片段（如果使用隨機引物，將出現多個小片段）。

偶氮胭脂紅B
〖英文名稱〗：Azocarmine B；Rosinduline 2B；C.I.50090
〖其他名稱〗：偶氮洋紅B；偶氮紅B
〖CAS號〗：25360-72-9
C28H17N3Na2O9S3=681.62
〖級別〗：BS
〖熔點〗：≥300℃
λmax：～516 nm (H2O)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：紅棕色粉末。易溶于吡啶，溶于水和乙二醇，極微溶于乙醇、乙酸乙酯、二甲苯、丙同、氯方、苯甲醇和橄欖油。水溶液呈藍紅色，加鹽酸有棕色沉淀。在濃硫酸中呈綠色，稀釋后有藍棕色沉淀。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)生物染色。色譜和電泳中蛋白染色。
〖保存〗：RT
偶氮胭脂紅G
〖英文名稱〗：Azocarmine G；Rosinduline GXF；Rosazine；Rosinduline；N-Phenylrosinduline sulfonic acid disodium salt；C.I.50085
〖其他名稱〗：酸性紅101；偶氮洋紅G；玫紅對氮蒽；偶氮紅G；羅星杜林；玫紅杜林
〖CAS號〗：25641-18-3
C28H18N3NaO6S2=579.58
〖級別〗：BS
〖鑒別〗：合格
λmax：523～526nm (H2O)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：帶金黃色光澤的紅色或棕色或紫色粉末。微溶于水,溶液呈藍紅色。
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)組織染色。氧化還原指示劑。
〖保存〗：RT
酒石黃
〖英文名稱〗：Tartrazine；Tartar yellow；3-Carboxy-5-hydroxy-1-p-sulfophenyl-4-p-sulfophenylazopyrazole trisodium salt；4-(p-Sulfobenzeneazo)-1-p-sulfophenyl-5-hydroxypyrazole-3-carboxylic acid trisodium salt；C.I.19140

三合一 RNA 上樣液 ( 含 EB)     MDS 42recA trfA 菌種
三合一 RNA 上樣液 ( 無 EB)     *0 菌種
RNA 電泳液 ,10×    LBA4404 農桿菌菌種
RNA 電泳液 ,10×    Oligo 快速復性液，10×
RNase A 溶液，10mg/mL    天凈沙 DNA 甲基化修飾試劑盒
溴化乙錠溶液 ,10 mg/mL    MnCl2溶液，25mM，PCR 
水飽和酚    一管式雙鏈 cDNA 合成試劑盒
Tris 飽和酚    柱式海洋動物 DNAout
Cre/Lox 系統載體系列    克必隆 eTS mRNA 擴增試劑盒
電泳 SYBR Green I    克必隆 eTS PCR 法 cDNA 合成試劑盒
RNase 抑制劑