細(xì)胞名稱  人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)；KP-N-NS使用說明書
形態(tài)特性   上皮樣
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)
特征特性   該細(xì)胞源自腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤的腦轉(zhuǎn)移灶。STR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞與人腎癌細(xì)胞OS-RC-2為同一遺傳背景，懷疑存在交叉污染。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3~1:4傳代，2~3天1次。
傳代情況  C2
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  培養(yǎng)法（-）
STR   Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12，13；D13S317：8，12；D16S539：11；D18S51：14；D19S433：13，14；D21S11：31.2；D2S1338：20；D3S1358：17；D5S818：11，12；D7S820：10，11；D8S1179：14；FGA：24；TH01：6；TPOX：8，11；vWA：16；
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)；KP-N-NS使用說明書復(fù)蘇操作要點(diǎn)： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。 
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)；KP-N-NS使用說明書操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
-氨基噻吩-3-甲酸乙酯    CAS號(hào)：    31891-06-2    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
2-溴丁酸甲酯    CAS號(hào)：    3196-15-4    現(xiàn)貨供應(yīng)
5,6-二氨基脲嘧啶    CAS號(hào)：    32014-70-3    說明書
4-溴-2-苯甲酸    CAS號(hào)：    320-31-0    報(bào)價(jià)
2-氯-5-氨基三氟甲苯    CAS號(hào)：    320-51-4    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
3,5-二氟苯甲醛    CAS號(hào)：    32085-88-4    現(xiàn)貨供應(yīng)
2-氟-5-甲基苯甲酸    CAS號(hào)：    321-12-0    說明書
2-IODOPYRAZINE    CAS號(hào)：    3211-21-0    報(bào)價(jià)
1-氟萘    CAS號(hào)：    321-38-0    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)人*Ⅲ(FⅢ)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人*Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人*原片段F1+2(F1+2)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人*血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人*受體(TR)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人*抗*復(fù)合物(TAT)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)；KP-N-NS使用說明書人*（TM）ELISA試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人凝聚素(CLU)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人凝膠原蛋白(gelson)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝