中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]復蘇 | 半貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]復蘇
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 動物用小鼠T細胞(Th1)進行免疫接種。 脾細胞與NS-1骨髓瘤細胞融合。 在活化的小鼠T細胞上檢測到表達的一個39KDa抗體蛋白。 1992年五月提交到ATCC的培養物污染了支原體。 其后代通過BM 細胞周期蛋白處理21天消除支原體。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優質胎牛血清,10%;0.05mM β-巰基乙醇
傳代方法 1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]復蘇細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]復蘇操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
HEC1 癌細胞高表達蛋白Hec1抗體
Phospho-HSL (Ser865) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體
HDAC1 組蛋白去乙酰化酶1抗體
C1GALT1C1 半乳糖基轉移酶2抗體
phospho-HP1 alpha (Tyr24) 磷酸化異染色質蛋白1抗體(果蠅)
Phospho-HP1(Tyr43) 異染色質蛋白1磷酸化抗體(果蠅)
HIF 2 alpha 缺氧誘導因子2α /HIF-2α抗體
H1N1 matrix protein 2 甲型流感病毒M2抗體
HSP47 熱休克蛋白-47抗體麥康凱肉湯 MacConkey Broth 250g/瓶 用于腸道菌的選擇性培養
EC-MUG培養基 EC-MUG Medium 2000ml/瓶 用于大腸埃希氏菌計數
MUG營養瓊脂培養基 NA-MUG Medium 2000ml/瓶 大腸埃希氏菌濾膜法計數
MMO-MUG培養基 MMO-MUG Medium 100g/瓶 總大腸菌群濾膜法檢測計數
Endo培養基 Endo Medium 250g/瓶 用于大腸菌群的檢測
m-Endo肉湯 m-Endo Broth 250g/瓶 用于水中大腸菌群膜過濾法檢測
麥康凱肌醇阿東醇羧芐*瓊脂(MIAC)基礎 MIAC Agar Base 100g/瓶 用于克雷伯氏菌選擇性分離,每100ml培養基中添加1支麥康凱肌醇阿東醇羧芐*瓊脂(MIAC)基礎
腸道菌增菌肉湯(EE肉湯) Enterobacteria Enrichment Broth 250g/瓶 用于腸道菌的增菌培養
溴甲酚紫乳糖瓊脂 Purple Lactose Agar 250g/瓶 用于分離發酵乳糖的細菌
A1培養基 A1 Medium 250g/瓶 用于水源中大腸菌群的檢驗
改良EC肉湯(mEC+n)基礎 Modified EC Broth Base 250g/瓶 用于O157選擇性增菌,每225ml培養基中添加1支新生霉素儲備液,每100ml培養基中添加1支新生霉素儲備液
*麥康凱瓊脂(CT-SMAC瓊脂基礎 Sorbitol MacConkey Agar (CT-SMAC Agar Base) 250g/瓶 用于O157菌選擇性分離,每100ml培養基中添加亞碲酸鉀溶液和*溶液各1支,組成改良*麥康凱瓊脂
麥康凱肉湯基礎(CT-MAC肉湯基礎) CT-MAC Broth Base 250g/瓶 含結晶紫、中性紅,用于O157 菌選擇性增菌,每100ml培養基中添加亞碲酸鉀溶液和*溶液各1支
中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤;MR1 [derivative of HB-11048]復蘇月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-MUG(LST-MUG) Lauryl Sulfate Tryptose Broth-MUG 1000ml/瓶 用于O157菌鑒定
*麥康凱半固體培養基 Sorbitol MacConkey Semi-solid Medium 250g/瓶 用于O157菌種保存