抗NADH脫氫酶亞單位1單抗雜交瘤細胞；LP-NADH-F11復蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱  抗NADH脫氫酶亞單位1單抗雜交瘤細胞；LP-NADH-F11復蘇
形態特性   淋巴母細胞樣
生長特性  半貼壁生長
特征特性    
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況  C30
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。
L-天冬氨酸    shēng huà shì jì    容量：    RT    5克
L-*甲酯鹽酸鹽    shēng huà shì jì    容量：        1公斤
L-蘇氨醇    shēng huà shì jì    容量：    RT    25克
L-*甲酯鹽酸鹽    shēng huà shì jì    容量：        1公斤
L-鼠李糖    shēng huà shì jì    容量：        500克
L-叔*    shēng huà shì jì    容量：    RT    5克
L-腎上腺素    shēng huà shì jì    容量：        25克
L-山梨糖    shēng huà shì jì    容量：    RT    5克
L-*甲酯鹽酸鹽    shēng huà shì jì    容量：    RT，避光    25克
L-乳酸鈉    shēng huà shì jì    容量：        500克
L-乳酸鉀    shēng huà shì jì    容量：    2～8℃    5克
L-乳酸    shēng huà shì jì    容量：        25克兔血小板因4(PF-4/CXCL4)免疫試劑盒    Rabbit Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit
兔透明質酸酶(HAase)免疫試劑盒    Rabbit Hyaluronidase,HAase ELISA Kit
兔透明質酸(HA)免疫試劑盒    Rabbit Hyaluronic acid,HA ELISA Kit
兔肽聚糖(PG)免疫試劑盒    Rabbit peptidoglycan,PG ELISA Kit
兔髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒    Rabbit myelin basic protein,MBP ELISA Kit
兔髓過氧化物酶(MPO)免疫試劑盒    Rabbit Myeloperoxidase,MPO ELISA kit
兔瘦素(LEP)免疫試劑盒    Rabbit Leptin,LEP ELISA Kit
兔*結合蛋白4(RBP-4)免疫試劑盒    Rabbit Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit
兔生長激素釋放多肽(GHRP)免疫試劑盒    Rabbit Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit