一、實驗目的
初步了解什么是染色體帶型，掌握染色體G顯帶方法。
二、實驗原理
染色體的分帶是70 年代發展起來的技術，其中使用zui廣泛的是G帶。顯示G 帶的方法很多，zui常用的是將已制成染色體標本的玻片進行預處理，然后進行Giemsa染色。預處理的方法很多，如用熱堿、各種蛋白酶、尿素、去垢劑或其它溶液等，其中zui常用的是用胰蛋白酶進行預處理，方法簡便，周期短。
G帶區在DNA較豐富的A-T 對，在間期核呈固縮狀態，而且是DNA晚復制區之一。有相當一部分中度重復序列DNA可能在G帶區，Giemsa染料在G帶區是與DNA結合，而且與結合DNA的染色質非組蛋白有關。G帶區位于染色體的兩臂上，和Q帶區相對應，而與Ｒ帶區相反。
獲得優良的G帶需要反復的實踐，干凈的制片，豐富而又清楚的分裂相，固定的實驗條件和足夠的經驗是十分重要的。
三、實驗材料
小白鼠骨髓細胞染色體制片不經染色留下的標本片。
四、實驗器具和藥品試劑
顯微鏡、冰箱、恒溫箱、水浴鍋、立式染缸、鑷子、切片架、切片盒、燒杯、量筒、吸管。
胰蛋白酶(Diffco,1:250)、乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)、氯化鈉、PH6.8磷酸緩沖液 、Giemsa 原液、2×SSC溶液。
五、 實驗方法和步驟
G帶的方法很多，現介紹3種方法，但無論那種方法，片齡以不超過5天為宜。
(一)胰蛋白酶－EDTA法
1．0.1％胰蛋白酶和0.02％EDTA按1：1混合于立式染缸中，并調至PH6.8，暫置冰箱中備用。
2． 將在37℃溫箱中預處理3個小時的標本片分別浸入胰蛋白酶和EDTA混合液中，輕輕搖動30～75秒鐘。
3． 將處理過的標本在磷酸緩沖液中漂洗數秒。
4． 立即用1:10 Giemsa染液染色20～40 分鐘。
5． 流水沖洗，空氣干燥后鏡檢。
(二)胰蛋白酶消化法
1．37℃烤片2～3小時。
2．將制片放入37℃預熱或15℃預冷的0.25％的胰蛋白酶溶液中5～30秒。
3．0.85％NaCl溶液沖洗兩次，涼干后染色。
(三)ＡＳＧ(Acetic-saline-Giemsa)法
1．用甲醇、冰醋酸固定液固定，空氣干燥法制片的標本。
2．浸入2×SSC溶液中，60℃溫育1小時。
3．蒸餾水沖洗。
4．1/20 Giemsa 染液染色1 小時。
5．水洗后涼干鏡檢。