原理：SABC法是利用鏈酶親和素(Streptavidin)與生物su (Biotin)*的高度親和力這一生物學性質，先將生物su 與辣根過氧化物酶(HRP)結合，形成生物su 化HRP，然后與鏈酶親和素按一定比例混合，形成SABC復合物。用生物su 化二抗與第一抗體結合，再與SABC復合物聯結形成抗原～抗體～生物su 化二抗～ SABC復合物。最后用底物顯色劑顯色。

特點：該法具有靈敏度高以及低背景染色等特點。

2. 直接酶標二抗法

該法是將HRP/AP酶分子直接標記于二抗上。因此需要普通的酶標二抗即可完成。實驗簡單，成本低，但是因為沒有信號放大作用，所以對很多表達豐度不是很高的抗原就可能檢測不到。

原理：根據生物su (Biotin) 與鏈霉親和素(Streptavidin)具有強結合力的原理設計。在一抗（兔源與鼠源）與相應的靶抗原結合后，生物su 化標記的抗多價二抗與一抗特異結合；二抗上標記的生物su 與標記了辣根過氧化物酶（HRP）的鏈霉親和素結合，形成抗原～特異性一抗～生物su 化的二抗～HRP 標記的鏈霉親和素復合物。

特點：該法孵育時間短（通常為10min），靈敏度高以及低背景染色等特點。

原理：該法采用一段多聚氨基酸聚合物做為載體鏈，將該多聚物與二抗結合，然后可再標記上多個HRP/AP酶分子，所以同樣具有很高的信號放大作用。

特點：靈敏度高；操作步驟簡單；無需進行內源性的生物su 封閉。