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中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 使用說明書

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更新時間:2017-02-13 10:38:36瀏覽次數:344次

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產品簡介

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?;CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

產品名稱中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。籆HO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA使用說明書
貨期3-5天
發貨地上海

細胞名稱  中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?;CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA使用說明書
形態特性   上皮細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養條件   DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況  C9
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  未定

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?;CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA使用說明書復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?;CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA使用說明書操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
人的牛血清白蛋白(BSA)免疫試劑盒    Human bovine serum albumin,BSA ELISA kit
人蛋白磷酸酶1調控/抑制因亞基1A(PPP1R1A)免疫試劑盒    Human protein phosphatase 1 regulatory subunit A,PPP1R1A ELISA Kit
人蛋白*磷酸酶自身抗體免疫試劑盒    Human Tyrosine Phosphatase Autoantibodies ELISA Kit
人蛋白*磷酸酶1B(PTP1B)免疫試劑盒    Human protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B ELISA Kit
人蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒    Human PRG4 ELISA Kit
人蛋白*脫亞氨酶4(PADI4)免疫試劑盒    Human PADI4 ELISA kit
人蛋白*甲基轉移酶1(PRMT1)免疫試劑盒    Human PRMT1 ELISA Kit甲基丙烯酸正丁酯    Butyl methacrylate    97-88-1
甲基橙;金蓮橙D;對二甲基氨基偶氮苯磺酸鈉    Methyl orange;Gold orange;Helianthine B;Tropaeolin D;SodiuM p-diMethyl-aMinoazobenzene sulfonate;4-{[4-(DiMethylaMino)phenyl]azo} benzene sulfonic acid sodiuM salt;p-DiMethyl-aMinoazobenzene sodiuM sulfonate;C.I.13025    547-58-0
甲基硅油 I    Methyl silicone I    
甲基紅百里酚藍    NA    
甲基環己烷;六氫;環己基甲烷    Methylcyclohexane;CyclohexylMethane;Toluenehexahydride    108-87-2
甲基鋰    METHYLLITHIUM    917-54-4
甲基氯化鎂    Methylmagnesium chloride    676-58-4
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。籆HO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA使用說明書甲基三苯溴化磷    Methyltriphenylphosphonium bromide    1779-49-3
甲基*氧基硅烷    Trimethoxy(methyl)silane    1185-55-3
三氯甲基硅烷;甲基三氯硅烷;甲基三氯化硅    TrichloroMethylsilane    75-79-6
甲基纖維素    Methylcellulose (AS);MC    9004-67-5

 

 


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