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L1210（小鼠白血病細(xì)胞）操作步驟

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更新時(shí)間：2017-07-31 16:04:16瀏覽次數(shù)：299次

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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

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L1210（小鼠白血病細(xì)胞）操作步驟售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱：L1210（小鼠白血病細(xì)胞）操作步驟

細(xì)胞形態(tài)

淋巴母細(xì)胞樣

背景描述

L1210細(xì)胞的體外懸浮培養(yǎng)zui早是由G·Moore等(1966年)和P·Himmelfarb等(1967年)報(bào)導(dǎo)，源于用0.2%甲基膽蒽(溶解)涂抹雌性小鼠的皮膚誘發(fā)的腫瘤。L1210細(xì)胞廣泛用于化學(xué)因子和天然產(chǎn)物細(xì)胞毒活性的常規(guī)篩選；L1210細(xì)胞接種裸鼠在21天內(nèi)*(5/5)成瘤。

生長(zhǎng)培養(yǎng)基

DMEM高糖(貨號(hào):PM150210)＋10% FBS(貨號(hào):164210-500)＋1% P/S(貨號(hào):PB180120)

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細(xì)胞名稱	L1210（小鼠白血病細(xì)胞）操作步驟
規(guī)格	5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
價(jià)格	來(lái)電可享受優(yōu)惠

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買(mǎi)本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問(wèn)題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過(guò)五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過(guò)一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
磷酸化磷酯酶Cγ1抗體 Phospho-PLC gamma 1(Tyr775)
磷酸化磷酯酶Cγ2抗體 Phospho-PLC gamma 2(Tyr753)
磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 Phospho-Paxillin(Tyr88)
磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 Phospho-Paxillin(Ser83)
磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 Phospho-Paxillin(Ser178)
磷酸化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)抗體 phospho-PKC beta 1/2(Thr500)
孕激素受體膜相關(guān)元件抗體 PGRMC
磷酸化P63腫瘤抑制基因抗體 Phospho-p63 (Ser395)
磷酸化P63腫瘤抑制基因抗體 Phospho-p63 (Ser455)
蛋白甘露糖基轉(zhuǎn)移酶1抗體 POMT1
磷酸化嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子4抗體 Phospho-p40phox (Thr154)
核糖體S6蛋白激酶β2抗體 P70 Beta 2
磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體 Phospho-p70 S6 Kinase Beta 2 (Tyr389)
磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體 Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr228)
磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體 Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr444 + Ser447)
磷酸化核糖體S6K2蛋白激酶抗體 phospho-P70 S6 Kinase beta 2 (Ser370)
磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體 phospho-P53(Ser15)
磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體 phospho-P53(Ser20)
磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體 phospho-P53(Ser37)
磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體 phospho-P53(Ser46)
磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體 phospho-P53
0.5mg
GPR30(G Protein Coupled Receptor 30) G蛋白偶聯(lián)受體30抗原   0.5mg
GnRHR peptide *釋放激素受體抗原   0.5mg
KiSS-1R/GPR54/GPCR54(KiSS-1 receptor/G-Protein Coupled Receptor 54) G蛋白偶聯(lián)受體54抗原   0.5mg
GRK2/BARK1 (G-protein coupled receptor kinase 2) G蛋白偶合受體激酶2抗原   0.5mg
GRM2/GLUR2 (Glutamate Receptor Metabotropic 2) 促代謝型*受體2抗原   0.5mg
GRP78(glucose regulated protein 78) 葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗原（熱休克蛋白70蛋白5）   0.5mg
GSK-3 Alpha (Glycogen Syhase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)   0.5mg
phospho-GSK-3 Beta(pSer9) 磷酸化葡萄糖合成激酶-3β抗原   0.5mg
phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216) 磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗原   0.5mg
GSR/GRase(glutathione reductase) *還原酶抗原   0.5mg
A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽   0.5mg
A/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine) A型豬流感病毒H1N1-M2蛋白   0.5mg
H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原   0.5mg
H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原   0.5mg
H2AX peptide 組蛋白H2AX多肽抗原   0.5mg
H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原   0.5mg
H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病