艾美捷Worthington Papain Dissociation System 是一套試劑,旨在用于 Huettner 和 Baughman 的神經細胞分離方法 ( J. Neurosci., 6 , 3044, 1986)。這些材料是為了方便和簡單而設計的,對偶爾使用的用戶以及更有經驗和經常使用的用戶都很有用。每個批次都經過大鼠脊髓神經細胞分離性能測試,該試劑盒為每次解離提供新鮮制備的酶溶液。
穩定性/儲存: 試劑在環境溫度下在正常運輸程序中預期的一段時間內是穩定的,但包裝在到達時應冷藏。使用前,內容物可在 2-8°C 下保存 4-6 個月。儲存在 2-8°C。
艾美捷Worthington木瓜蛋白酶解離系統包裝內容:
該包裝包含足夠的材料,可以分離五份最多 0.3-0.4 cm 3的單獨組織等分試樣。對于較大的組織樣本,在每個步驟中按比例準備較大體積的試劑,并按照協議中所述的相同比例將它們組合起來。
• 小瓶1: 含有鈣、鎂、碳酸氫鹽和酚紅的無菌厄爾EBSS,每包一瓶,100 毫升。該小瓶的等分試樣用于重構其他小瓶并制備稀釋的抑制劑溶液。在使用之間冷藏并在每次使用前用無菌 O 2 :CO 2平衡。
• 小瓶2:含有L-半guang氨酸和EDTA 的木瓜蛋白酶,每包5 x 100 單位一次性小瓶。該材料經 0.22 微米膜過濾并在高壓滅菌的小瓶中凍干。用 5ml EBSS(小瓶 1)重構的小瓶在 1mM L-半guang氨酸和 0.5mM EDTA 中產生每毫升 20 單位木瓜蛋白酶的溶液。需要在 37°C 下短暫孵育以確保*溶解和活性。
• 小瓶3:脫氧核糖核酸酶I (DNase),每包5 x 2000 單位一次性小瓶。
該材料經過 0.22 微米膜過濾并在高壓滅菌小瓶中凍干。用 0.5ml EBSS(小瓶 1)復溶的小瓶產生每毫升 2000 單位脫氧核糖核酸酶的溶液。避免劇烈混合。
• 小瓶4:含有牛血清白蛋白的卵類粘蛋白蛋白酶抑制劑,每包一瓶,重構后32ml。
該材料經過 0.22 微米膜過濾并在高壓滅菌小瓶中凍干。用 32ml EBSS(小瓶 1)復溶的小瓶產生的溶液的有效濃度為每毫升 10mg 的卵類粘蛋白抑制劑和 10mg 白蛋白。該小瓶的等分試樣用于每次解離。在使用之間冷藏并在每次使用前用無菌 O 2 :CO 2平衡。在 2-8°C 儲存時,重構后穩定。
還包括一張將顏色與 pH 值關聯起來的卡片,用作 O 2 :CO 2平衡的指南。
艾美捷Worthington木瓜蛋白酶解離系統相關研究:
膠原酶 (CLS1-4/CLSPA)
脫氧核糖核酸酶 I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)
透明質酸酶 (HSE/HSEP)
蛋白酶 K (PROK)
細胞分離優化系統 (CIT)
肝細胞分離系統 (HIS)
新生兒心肌細胞分離系統 (NCIS)
相關參考文獻:
1.Bader, C.、MacLeish, P. 和 Schwartz, E.: 對從 Tiger Salamander Retina 分離的孤立棒狀感光器的光的反應 , Proc Natl Acad Sci USA 75 , 3507, 1978
2.巴紹爾,馬克 M: 卷。五十八 (I) ,, , 124, 1979
3.Dreyfus, Cheryl F. 和 Black, Ira B.: Methods Neurosci 2 , 10, 1990
4.Finkbeiner, S. 和 Stevens, CF: 定量測量在評估gu氨酸神經毒性中的應用 , Proc Natl Acad Sci USA 85 , 4071, 1988
Worthington主要研究覆蓋生物技術和生命科學研究,診斷,生物制藥和生物加工應用的高質量純化酶,蛋白質,核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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