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Worthington丨艾美捷Worthington乙醇脫氫酶研究方案

時間:2022-10-20閱讀:87
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源自酵母的醇脫氫酶是一種金屬酶,每個分子含有四個緊密結合的鋅原子(Vallee and Hoch, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 41, 327, 1955)。乙醇酶促氧化的最佳 pH 值為 8.6-9.0,乙醛還原的最佳 pH 值接近 7.0

 

醇脫氫酶 (ADH) 是氧化還原酶家族的一部分,它使用 NAD +或 NADP +作為電子受體來催化醇的氧化(White and White 1997)。該反應是可逆的,底物可以是各種伯醇或仲醇以及半縮醛。酒精脫氫酶存在于大多數生物體中,酵母是酶的極為活躍形式。以下數據適用于面包酵母、釀酒酵母的酒精脫氫酶。

 

穩定性/儲存:在 2-8°下穩定 3-5 個月。

 

單位定義

在 25°CpH 8.8 條件下,一個單位每分鐘可減少 微摩爾 NAD

 

艾美捷Worthington乙醇脫氫酶特異性

酵母 ADH 的特異性比肝酶的特異性更窄。它接受乙醇,對直鏈伯醇有一定的活性。它對某些仲醇和支鏈醇的作用非常有限(Dickinson 和 Dalziel 1967a)。

 

艾美捷Worthington乙醇脫氫酶應用

伯醇和醛的酶法測定

手性化合物的合成

縮醛磷脂酶的分光光度測定

有機溶劑中的酶催化

NAD +NADHNADP +和 NADPH的研究

 

CATH分類

類別:阿爾法貝塔

架構:Alpha-Beta 復合體和 層 (aba) 三明治

拓撲:醌氧化還原酶;鏈 A,域 和羅斯曼折疊

分子量

146.8 kDa(理論值)

X佳 pH

5.4(肖爾和 Theorell 1966

消光系數

189,320 cm -1 M -1(理論值)

E 1%,280 = 12.89(理論值)

 

試劑:

0.1 M焦磷酸鈉緩沖液,pH 9.2

2 M乙醇。用試劑級水將12.12 ml 95%乙醇稀釋至100 ml

直徑0.025 M。注:NAD可能因鹽的形式和水合程度而異。應小心使用分析等級和正確的分子量。

0.1 M磷酸鹽緩沖液,pH 7.5

0.1%白蛋白(BSA

 

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艾美捷Worthington乙醇脫氫酶部分參考文獻:

Abdallah, M. , Biellmann, J. , Cedergren-Zeppezauer, E. , Gerber, M. , Dietrich, H. , Zeppezauer, M. , Koerber, S. , MacGibbon, A. and Dunn, M.

Reaction of the Z Isomer of 4-trans-(N,N-dimethylamino)cinnaldoxime with the Liver Dehydrogenase-Oxidized Nicotinamide Dinucleotide Complex , Biochemistry 23 , 1003 , 1984

Ainslie, G. and Cleland, W.

Isotope Exchange Studies on Liver Alcohol Dehydrogenase with Cyclohexamol and Cyclohexanone as Reactants , J Biol Chem 247 , 946 , 1972

Anderson, B. and Reynolds, M.

Multiple Inhibition of Yeast Alcohol Dehydrogenase by Heterocyclic Nitrogen Bases , Arch Biochem Biophys 114 , 299 , 1965

 

Worthington核心酶用于生命科學研究、原代細胞和干細胞分離、生物加工、生物制藥、診斷和生物技術應用。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。


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