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艾美捷牛C-反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒原理

時間:2022-12-27閱讀:71
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C-反應蛋白(C-Reactive Protein,CRP) 是由肝臟生成的血漿蛋白,主要被當作發炎的指標,因其對肺炎雙球菌的C-多糖體(C-polysaccharide)會產生沉淀反應,故取名C-反應蛋白。C-反應蛋白由524KD原聚體(含206個氨基酸)以非共價連結成為五元體環形結構。    

 

C反應蛋白會結合在死亡細胞或微生物外膜上的磷酸膽-堿(phosphocholine),以激活補體系統。當體內有急性炎癥、細菌感染、組織的損傷時,C反應蛋白在數小時內出現,而疾病治愈后又很快就消失。C反應蛋白并不適用于單一疾病的診斷。它的臨床價值主要在于組織損傷的篩檢和監測,應用在判斷病人是否發炎以及診斷發炎性疾病復發的可能性,藉以評估抗發炎藥物治療的成效。另外C反應蛋白可用來協助類風濕性關節炎的診斷。   

 

它在肝臟中合成,在人體中通常作為血清中的痕量成分存在,水平低于0.3 mg/dL。 在急性組織損傷后血清中的水平迅速升高,并且在刺激物去除后也非常迅速地下降。已提出CRP有助于補體激活,影響吞噬細胞功能并增強細胞介導的細胞毒性。過去幾年的研究已經表明,血漿或血清中CRP的定量可以提供不僅在人類中,而且在寵物和農場牲畜中的疾病的檢測、預后和監測中的有價值的信息。

 

艾美捷牛C-反應蛋白(CRPELISA試劑盒預期用途:

該試劑盒是一種高度靈敏的雙位點酶聯免疫分析(ELISA),用于定量測定牛生物樣品中的CRP。僅供研究使用。

 

艾美捷牛C-反應蛋白(CRPELISA試劑盒原理:

雙抗體夾心ELISA的原理如圖1所示。在該測定中樣品與吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗CRP抗體反應。通過洗滌去除未結合的蛋白質后,添加。這些酶標記的抗體與先前結合的CRP形成復合物。跟隨另一個洗滌步驟,通過添加顯色底物3,3',5,5'來測定與免疫吸附結合的酶-四甲基聯苯胺(TMB)。結合酶的數量直接隨樣品中CRP的濃度而變化測試;因此,在450nm處的吸光度是測試樣品中CRP濃度的量度。數量測試樣品中的CRP可以從由校準品構建的校準曲線中插值,并根據樣品稀釋。

 

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艾美捷牛C-反應蛋白(CRPELISA試劑盒組件:

1.濃縮稀釋劑

一瓶含有50mL 5X濃縮稀釋液流動緩沖液。

2.濃縮洗滌液

一瓶含有50mL 20X濃縮洗滌液。

3.酶抗體結合物濃縮物

一個含有150µL 100X濃縮親和純化的抗牛CRP抗體的小瓶

穩定緩沖液。

4.TMB基板溶液

一瓶含有12mL TMB和過氧化氫的檸檬酸緩沖液(pH 3.3)。

5.微量滴定板

12個可拆卸的8個井條,位于井支架框架內??子糜H和純化的抗牛CRP包被。

6.CRP校準器

一個裝有凍干牛CRP校準品的小瓶。

 

性能特性:

根據良好的實驗室實踐,特定CRP的測定需要嚴格的質量控制。每個實驗室應使用常規質量控制程序來確定批間和批內精密度和性能特征。

程序的限制

1.當用完整的分析程序進行分析時,將獲得可靠和可重復的結果了解包裝說明書中包含的信息,并遵守良好的實驗室實踐

2.可能影響測定性能的因素包括適當的儀器功能、玻璃器皿的清潔度、蒸餾水或去離子水的質量、試劑和樣品移液管的準確度、清洗技術、培養時間或溫度。

 

除此之外,Kamiya還有各種不同種屬的C-反應蛋白(CRPELISA試劑盒。


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