ELISA試劑盒小常識(shí)

時(shí)間：2018/11/14閱讀：168

兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒

ELISA小常識(shí)：

酶標(biāo)抗體使用濃度的確定：于聚苯乙烯板孔中加足夠量的抗體包被,溫育一定時(shí)間，沖洗、把酶標(biāo)結(jié)合物倍比稀釋，每個(gè)稀釋度加2孔,溫育、沖洗、再加底物顯色、比色。以O(shè)D值為縱坐標(biāo),酶標(biāo)結(jié)合物的稀釋度為橫坐標(biāo)，制作曲線。找出OD值為1時(shí)，相對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)抗體稀釋度為適酶標(biāo)抗體稀釋度。這個(gè)稀釋度是指在這種條件下的適稀釋度，換個(gè)條件就不是適的了。如1﹕400的酶標(biāo)抗體稀釋度溫育6h可與1︰6 400稀釋度溫育24h結(jié)果相同。所以一旦條件確定之后，就不要變更，以保證結(jié)果的重復(fù)性和相對(duì)的準(zhǔn)確性。此適酶標(biāo)抗體稀釋度可做為工作濃度，也可提高半個(gè)至一個(gè)滴度，但不能提高過高，否則非特異性顯色增加。酶標(biāo)抗體的滴度反映酶標(biāo)抗體的質(zhì)量，也可以此比較酶標(biāo)結(jié)合物的優(yōu)劣。有材料報(bào)道認(rèn)為1︰320滴度為合格,1︰1 000以上更好。酶標(biāo)抗體滴度越高，用于工作濃度的稀釋倍數(shù)就越大，敏感性就越高，非特異性反應(yīng)就越低。

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