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ELISA實驗包被過程講解2025/4/27
包被是ELISA實驗第一步，也是比較關鍵的一步。ELISA包被是指將抗原或抗體結合到固相載體表面的過程，也稱為固相化。1、選擇合適的包被抗原包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原。天然蛋白直接從...
免疫熒光技術直接法優缺點2025/4/15
免疫熒光（immunofluorescencetechnic）以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術（fluorescentantibodytechnique）。直接法是熒光抗體技術z...
原代細胞的提取操作過程2025/4/7
原代細胞是指直接從機體取出的安排或細胞獲得單個細胞并在體外進行培育的細胞。這里主要指：安排器官、外周血及胚胎等。由于原代細胞成長緩慢，繁衍必定的代數中止成長。所以一般認為：培育的原代的1代和傳代到10...
抗原抗體反應特異性解讀2025/4/3
抗原抗體的結合實質上只發生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結合位點之間。由于兩者在化學結構和空間構型上呈互補關系，所以抗原抗體反應具有高度的特異性。例如乙肝病毒中的表面抗原（HBsAg）、e抗原（HBe...
ELISA試劑盒實驗結果必看干貨2025/3/24
定性和定量是ELISA測定按其表示測定結果的方式分為的兩大類。定性測定是對標本中是否存在待測抗原或抗體作出結論，分別用“陽性"和“陰性"來表示。由此可見傳染性病原體的抗原或抗體通常是用的定性測定，以此...
澤瀉探針法PCR鑒定試劑盒試驗循環參數2025/3/17
澤瀉探針法PCR鑒定試劑盒試驗循環參數：1.預變性（Initialdenaturation）模板DNA變性與PCR酶的激活對PCR能否成功至關重要，建議加熱時間參考試劑說明書，一般未修飾的Taq酶激活...
細胞凍存樣本復溫與檢測流程2025/3/11
凍存樣本復溫與檢測流程：1.解凍步驟?：從-80℃/-20℃轉移至4℃冰箱，緩慢解凍（推薦過夜）.禁止?：室溫快速解凍或水浴加熱（易導致蛋白變性或細胞碎片增加）。2.離心處理?：解凍后樣本需3000×...
ELISA試驗手工洗滌操作2025/3/3
ELISA試驗手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種方法：一、浸泡式1.吸干或甩干孔內反應液；2.用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去）；3.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1～2分鐘，間歇搖動，浸泡...
多克隆抗體及單克隆抗體的制備2025/2/24
1、多克隆抗體的制備：①免疫方法：對多克隆抗體，免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮內免疫法、淋巴結免疫法和混合法等。一般來說，皮下或肌肉免疫法產生的抗體比較多；皮內免疫法所需的抗原量少，在抗原寶貴時特...
實時熒光定量 PCR（RT-qPCR）反應主要步驟2025/2/17
實時熒光定量PCR(RT-qPCR)是一種用于實時擴增和檢測特定DNA或RNA序列的分子生物學技術。該方法利用熒光染料或探針，當與擴增的DNA或RNA分子結合時會發出信號，從而可以對目標序列進行量化。...
實驗室進行預實驗原因2025/2/10
如何進行預實驗？為什么要進行預實驗？1、選擇2~3個預期結果差異比較大的樣品，嚴格按照說明書進行操作，注意儀器工作狀態，操作規范，控制好測定條件，尤其是時間和溫度。2、預實驗的目的是：①確定該試劑盒是...
ELISA實驗標準曲線的技術解答2025/2/5
ELISA實驗標準曲線的技術解答：1.設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內，包括上限和下限。而對于呈S型的標準...
PCR反應引物設計的基本原則2025/1/20
PCR反應中有兩條引物，即5′端引物和3′引物。設計引物時以一條DNA單鏈為基準（常以信息鏈為基準），5′端引物與位于待擴增片段5′端上的一小段DNA序列相同；3′端引物與位于待擴增片段3′端的一小段...
原代細胞和傳代細胞培養比較2025/1/13
一、定義方面：1、原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的第1次培養，也叫初代培養。2、傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分，重新接種到另外的培養器皿（瓶）內，再進行培養的過程。對單層培養而言，80%...
影響抗原抗體反應主要因素有什么2025/1/6
抗原抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發生的特異性結合反應。這種反應既可在機體內進行，也可以在機體外進行。抗原抗體反應的過程是經過一系列的化學和物理變化，包括抗原抗體特異性結合和非特異性促凝聚兩個階段，...
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