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HMGB-1 elisa檢測試劑盒操作流程

時間:2019/10/18閱讀:254
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                     HMGB-1 elisa檢測試劑盒操作流程

 進了果園,我們看見果園里的各種各樣,五彩繽紛.每棵樹都是碩果累累的.你看那葡萄,在太陽的照射下像一顆顆珍珠似的;紅棗像一個個小燈籠,墜彎了樹枝;那三個一群,五個一伙的蘋果,把樹枝都壓彎了,一陣輕風吹來,樹枝不停地晃動,枝頭上的蘋果也跟著一起“跳舞”呢!接下來介紹 HMGB-1 elisa檢測試劑盒操作流程

組成及試劑配制 

1. 酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。 

2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。

3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)

8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 

9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 

10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)

樣本

1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;

類風濕因子的控制方法:

①用F(ab)2替代完整的IgG;

②標本用聯有熱變性IgG的固相吸附劑處理;

③檢測抗原時,可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解;

補體的控制方法:

①用EDTA稀釋標本;

②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;

2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;

控制方法:采血時規范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。

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