ELISA檢測試劑盒原理：

1、免疫熒光細胞化學(xué)技術(shù)
將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察.當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后會發(fā)出一定波長的熒光,從而可以確定組織中的抗原定位或定量。

2、免疫酶細胞化學(xué)技術(shù)
是目前免疫組織化學(xué)研究中的技術(shù)．基本原理是先以酶標(biāo)記的抗體與組織或細胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡，對細胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原進行定位或定性研究。

ELISA檢測試劑盒操作步驟：

1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。

2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。

注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設(shè)置復(fù)孔。

3. 加樣：依照標(biāo)準品的順序分別加入 100ul 的標(biāo)準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 100ul 的蒸餾水；其余微孔中加入100ul 的待測樣本。

4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準品組、待測樣本組各孔中加入 50ul 的酶標(biāo)溶液（空白對照孔除外）。

5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。

6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。

7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。

8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。

9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。