酶免疫分析 enzyme imrrmnoassay:EIA一種用酶來取 代放射免皮分析中的放射性核素，對抗原進行標記、再進行免疫結合反應以測定許多生物活性物質的定性和定量分析方 法。酶免疫分析根據抗原抗體反應后是否需要分離結合的和 游離的酶標記物，而分為均相和異相兩種類型。用酶作標記 物、具有對底物反應的放大作用而增加敏感性。
近年來，EIA技術取得了顯著的發展，主要表現在以下方面：
1、繼單克隆抗體后的第三代抗體基因工程抗體的應用，明顯地提高了檢測的特異性，基本消除了抗原、抗體間的非特異xing jiao叉反應，保證了分析的準確性。抗體制備技術的進步，使試劑的制備得以規模化，檢測范圍日益擴展，小分子抗原、半抗原的檢測成為事實。
2、分析方式的改進與多樣化提高了試驗的敏感性。
(1)除早期的競爭法，間接法外，又發展了雙抗原夾心法測抗體，偶聯酶標記法測抗原，橋聯酶免疫分析，酶放大免疫分析技術等，后者應用了生物素-親和素系統，底物循環放大系統，酶-抗酶放大系統及酶偶聯放大系統等。
(2)由于酶標記技術的進步，標記酶的應用已從過氧化物酶，擴展到堿性磷酸酶，β半乳糖苷酶，尿素酶，葡萄糖6磷酸脫氫酶，葡萄糖氧化酶，蘋果酸脫氫酶，至今有二十多種酶被應用于EIA ，但應用比較多的仍然是辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)和堿性磷酸酶(Alkalinephasphotase，ALP)。
(3)酶免疫分析與其它標記免疫分析相結合如與熒光免疫分析(Fluorescence Immunoassay ,FIA)結合形成熒光酶免疫分析(Fluorescence Enzyme Immunoassay ，FEIA)，酶促放大時間分辨熒光免疫分析(Enzyme-am-plified time-resolved fluoroimmunoassay ，EATRFIA)，EIA與化學發光免疫分析(Chemiluminescence immunoassay，CLIA)結合形成酶—化學發光免疫分析，增強化學發光酶免疫分析(ECLEIA)。EIA與聚合酶鏈反應結合形成的PCR-EIA分析等。
(4)改進固相載體的技術
傳統ELISA應用的固相載體是聚苯乙稀微孔板，聚苯乙烯珠或條，后發展為硝酸纖維素膜、活化濾紙、硅片、尼龍、利用高分子材料合成的各種固相微粒等。為提高固相表面的結合容量，增加結合物的范圍而改造聚苯乙烯的表面，如用化學偶聯法導入功能性醛基、酰基、烷胺基等以更好地與蛋白質，多肽的羧基結合，用位點導向性共價偶聯法引入親和素，蛋白A，多聚賴氨酸等，以牢固地捕獲蛋白或多肽，超平整聚苯乙烯表面的制備，克服了表面粗糙帶來的不均一性，達到平均粗糙度只有2A+的超平整平面，實現了對蛋白的結合容量大，脫附率低，孔間均一性好，使試驗精密度達5%。
應用于雙抗體夾心法時，聚苯乙烯經射線照射后，可以增加其吸附性能特別是對免疫球蛋白的吸附性能。近年美國Corning公司研制成功表面經琥珀酰亞胺酯活化酶標板，其質量達到氨基活化相似水平。
(5)分析方法的創新 如同步ELISA法測定多種抗體是將抗原包被在與微孔相匹配的釘板的釘子上，蓋上釘板的同時與微孔內的所需標本、試劑反應，是又一種改良ELISA。利用抗體和抗抗體能形成多層復合物的特性，將常規二步溫育法改為一步溫育測定法，使檢測時間大為縮短，現在已廣為應用。
