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ELISA試驗結(jié)果白板且陽性對照不顯色原因分析

時間:2022/6/28閱讀:1410
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試驗結(jié)果白板,而且陽性對照不顯色,常見原因如下:

原因1:漏加或者誤加試劑;

解決方法:檢查試驗記錄和剩余試劑。每次加液前均應(yīng)核對標(biāo)簽。

原因2:試劑過期;

解決方法:使用有效期內(nèi)的產(chǎn)品。

原因3:洗板液配制中出現(xiàn)問題,如量筒不干凈含HRP酶抑制物(疊氮鈉

等);

解決方法:使用干凈的器皿,正確配制試劑。

原因4:溫育的時間或溫度不夠;

解決方法:校正溫育箱溫度。

原因5:標(biāo)準(zhǔn)品失活或者丟失;

解決方法:標(biāo)準(zhǔn)品正確保存、溶解和混勻。

原因6:抗體失活或者丟失;

解決方法:更換抗體或者提高抗體濃度

原因7:酶失活或者丟失

檢查方法:把工作濃度的酶再稀釋20-100倍,取5uL加入50ul的顯色底物,終止后顯色是否能達(dá)到1.0左右,此為酶的粗略估計。

解決方法:更換酶或者提高酶的濃度。

原因8:顯色底物失活

檢查方法:加少量的工作濃度的酶,TMB是否很快顯色。

解決辦法:更換顯色底物.


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