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細胞傳代問題分析：
1、傳代密度過高
一旦細胞養太久至融合度過高(>90%)才傳代，容易使細胞產生老化現象，甚至是堆疊，再消化細胞時不易吹打成單顆細胞，即便再重新鋪盤傳代，細胞也無法回到原本的特性了。(如：單層細胞，沒長滿就發生堆疊現象)。
解決方案：
盡量避免融合度過高，鏡下觀察融合度約達到80%即可傳代分盤。
細胞融合度：在細胞培養中指的是細胞在培養表面(培養皿/瓶)所占的比例。
2、傳代密度過低
哺乳動物貼壁培養細胞，若細胞培養到80-90%密度需要開始傳代，在傳代接種細胞密度過低，細胞間距離太遠，就無法在細胞間產生黏附及通信作用，幫助信號傳導并活化細胞；總體細胞量不足，分泌的生長因子濃度會不足以產生利于生長的微環境，以上皆會造成增殖速度遲緩或細胞死亡。
解決方案：
細胞傳代時，要進行準確的細胞計數，確保鋪盤的密度。
3、凍 存
細胞凍存的基本原理：慢凍
手動降溫：將細胞依序放在4℃(30分鐘)、-20℃(1小時)、-80℃(過夜)后移至液氮中保存。
程序降溫盒：是一般廣泛使用的降溫法，為一種特制冷凍容器(填充異丙醇或依靠特制金屬導熱)，使細胞以每分鐘約-1℃的速度降至-80℃(過夜)，然后移至液氮中保存。
由此可以看出，程序降溫精準度更高，優于手動降溫。
部分低溫保護劑在緩慢冷凍過程中雖然會保護細胞，但它們也會引起細胞毒性，尤其是在室溫下。因此，在標準的自制凍存液中，會含有血清，血清是用來降低細胞毒性的，但血清也不是完整的。
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