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關于elisa這些基本性質你了解多少

時間:2019-4-11閱讀:73
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  什么是定性?什么是定量?
 
  這些問題是不少實驗新手在購買elisa試劑盒時會咨詢到的問題。由于客戶們在訂購產品的時候咨詢到的是我司業務員,對于一些產品訂購流程,基本信息(如規格)等問題,業務員們會跟您細細的解說,涉及到技術問題時業務員會幫您安排技術指導。
 
  什么是定性?什么是定量?
 
  ·定性是指判定物質有無的屬性;
 
  ·定量是指判定物質的用量,定量的前提是定性,目前生化試劑大都為定量檢測。
 
  標準物質是具有一種或幾種物理或化學性質已經充分確定,并用于校正儀器、評價一種測量方法的物質;
 
  而校準物是一種用于校準、分度或修正測量值的物質或裝置,這種物質和裝置必須跟蹤國家或的標準物質或裝置;校準物是公司用來校準某檢測系統(儀器+試劑+方法)的;
 
  質控品與校準品的區別:組成成份不一樣;溯源的要求不一樣;用途不一樣。
 
  將樣品加入孔中并孵育,假如其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會與HEV的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經第二次孵育后,酶結合物就會與次孵育結合上的HEVIgM抗體相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發生酶-底物反應,只有那些含有HEVIgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會發生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,并在波長:450nm處丈量O.D.值,按照測試尺度,O.D.值大于或即是Cut-Off值的樣品被以為是初試陽性。應用定性夾心免疫檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段。
 
  包被原的性質很重要,蛋白濃度,是否降解,這關系到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保留抗原很重要。就是讓大量不相關的蛋白質充填這些曠地空閑,從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質的再吸附。但有時因為試驗的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。

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