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分享蛋白提取規則及蛋白質的儲存

時間:2021-12-15閱讀:89
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總體規則:

蛋白酶普遍存在,在提取蛋白質的步驟中,早些抑制,經常抑制。

分裝蛋白溶液,儲存于不同的溫度和不同的緩沖液中,測蛋白活性,找出適宜儲存條件。

冷藏,并加入穩定劑。這些穩定劑一般都能充分保持蛋白的生物學活性。

將蛋白溶液儲于50%(V/V)的甘油或懸于硫酸銨(3.2M)中,避免凍存。

冰結晶會造成物理剪切及蛋白變性。

避免酶的反復凍融,如果酶需要凍存,分裝成小管后凍存。

蛋白質的儲存:

蛋白樣品在液氮中速凍,拿出后加入10-20%的甘油,長期儲存。

整個實驗過程中,都要將蛋白樣品置于冰上。

從母管中吸取不同的蛋白時,都要用新鮮的槍頭。

不要將未用的溶液倒回母管。

戴手套操作,避免蛋白交叉污染,或是蛋白酶的污染。

避免劇烈的震蕩,避免溶液中混入蛋白變性劑。

實驗的過程中應避免灰塵進入,灰塵包含60%的肌氨酸。


操作過程中:
操作時總是小體積小量的操作,避免污染,并且動作要快
 


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