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我們對4種融合蛋白在細胞中的動態分布進行了72小時的連續觀察.在細胞質中首先出現微弱的綠色熒光,隨著融合蛋白表達量的增加,綠色熒光在細胞質中呈細絲狀,細絲逐漸縮短變粗,zui后變成點狀,此時細胞核內沒有熒光分布.逐漸地,融合蛋白在細胞核周圍聚集,表現為細胞核周圍的熒光較強,接著融合蛋白進入細胞核,表現為綠色熒光在細胞核和細胞質中均有分布.這一結果表明,這4種細胞質肌動蛋白與GFP的融合蛋白表達后,均能進入細胞核.
特性及肌動蛋白在細胞內動態分布
除了以上共同的分布規律外,α—肌動蛋白—GFP融合蛋白和其它3種融合蛋白的分布規律有所區別.此種融合蛋白進入細胞核后,細胞核內的熒光比細胞質內熒光強,有的細胞幾乎所有的熒光都集中在細胞核內.也就是說α—肌動蛋白—GFP融合蛋白較多地集中在細胞核內,而其它3種融合蛋白則是在細胞核和細胞質內均有較多的分布.通過4種肌動蛋白的氨基酸序列比較分析,發現α—肌動蛋白的一級結構與其它3種肌動蛋白存在一定程度的差異,這些差異可能導致它們在空間結構和等電點上的區別.可能正是因為這些區別造成了它們進核能力的不同,從而表現出不同的分布特點.
肌動蛋白是真核細胞中普遍存在的一類高度保守的蛋白質家族.在肌肉細胞中肌動蛋白作為肌絲的主要成分,參與肌肉的收縮運動;在非肌肉細胞中肌動蛋白是構成細胞質骨架的主要成分,參與細胞運動、細胞分裂、維持細胞形態等生命活動.除了在細胞質中發揮重要的生理功能以外,近年來已有較多研究結果證實肌動蛋白還存在于細胞核中.人們推測肌動蛋白在細胞核內可能起著馬達分子的作用,參與染色體的折疊、包裝和RNA的轉錄運輸.
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