ELISA試劑盒實驗室適應株

    目前，市面上HIV抗體診斷試劑(ELISA試劑盒法)主要包括第三代和第四代HIV抗體診斷試劑。抗R7V抗體檢測試劑包被的是一種被稱為R7V的寡肽(RTPKIQV)，其檢測的靶物質為抗R7V抗體，該抗體可以中和HIV-1的原始病毒株和，而且，該抗體可以作為HIV感染者疾病進展的一個標記(Galea et a1．，1998；Haslin et a1．，2002；Sanchez et a1．，2008)。上述試劑的主要原材料或過程涉及的生物學材料、生物學技術(如采用雜交瘤技術單抗，采用基因重組技術抗原)等具有較大的變異性，與其相關的過程也具有內在的變異性，所以僅采用對終產品進行質量控制的方法尚不能控制產品的質量，需要對其工藝進行優化和質量控制，以有效地保證體外診斷試劑產品在臨床使用過程中質量的穩定性。

    采用ELISA試劑盒法的HIV診斷試劑主要包括三類：HIV抗體檢測試劑、HIV-1 p24抗原檢測試劑以及抗RTV抗體檢測試劑。根據試劑所用抗原的來源、檢測的靶標記物以及試劑的檢測原理，HIV抗體診斷試劑可分為四代產品：*代HIV抗體診斷試劑于1985年問世，主要是采用天然的HIV全病毒抗原進行包被，采用免疫熒光素和酶標記的抗人IgG抗體，檢測抗HIV IgG抗體；第二代試劑主要使用基因工程重組和(或)人工合成肽作為抗原，

工藝的優化和質量控制，一般主要包括以下6個方面：

1)酶標板的選擇；

2)包被物和酶標記物的制備；

3)各種緩沖液的制備；

4)酶標板的包被；

5)試劑反應條件的初步確定；

6)試劑的優化。

采用間接法的原理檢測抗HIV IgG抗體；第三代試劑主要使用基因工程重組抗原，采用雙抗原夾心法的原理檢測抗HIV的總抗體(Thorstensson et a1．，1998；Beelaert et aL，2002；Wang et a1．，2006)；第四代試劑是第三代HIV抗體試劑和HIV-1 p24抗原檢測試劑的結合，ELISA試劑盒使用HIV抗原和抗HIV-1 p24抗體同時包被載體，加入待檢血清進行孵育，zui后加入酶標記的HIV抗原和抗HIV-1 p24抗體，司同時檢測血清中的HIV-1 p24抗原和抗HIV抗體(geom et a1．，2006；Speers et a1．，2005)。