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貨號 | A098228 |
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產品全稱:sp185/HER-2 檢測試劑盒
英文名稱:sp185/HER-2 ELISA Kit
產品貨號:A098228
規格:48T/96T
服務:公司產品僅用于科研可提供免費代測服務,以及產品說明書和技術指導等
保存環境:2-8℃低溫、避光、防潮
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..需要而未提供
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。 2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。 3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 4. 標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 6. 標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 |
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
大鼠肌鈣蛋白I(Tn-I)聯免疫吸附測定試劑盒BOC-L-谷氨酰對苯磺 98%橙花 FCC, ≥97%
大鼠相關血漿蛋白A(PAPPA)聯免疫吸附測定試劑盒BOC-L-谷氨酰十七烷 AR,95.0%1-萘 98%
大鼠性磷(ALP) 聯免疫吸附測定試劑盒BOC-L-谷氨酰亞氨二乙 98%6-并咪唑 98%
大鼠神經特異性烯化(NSE)聯免疫吸附測定試劑盒BOC-L-谷氨廣泛PH試紙(pH1-14) 1-14,顯色反應間隔14-(4-硝芐)吡啶 98%
大鼠胰高血糖樣肽1(GLP-1) 聯免疫吸附測定試劑盒BOC-L-谷氨廣泛PH試紙(pH1-4) 1-4,顯色反應間隔0.5 80條/盒2-酰 96%
大鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)聯免疫吸附測定試劑盒BOC-L-谷氨廣泛PH試紙(pH1-10) 1-10,顯色反應間隔0.5 80條/盒五化鈮 99.9%,-100 目粉末, 氬氣封裝
大鼠Smad同源物7 (Smad7) 聯免疫吸附測定試劑盒BOC-D-谷氨廣泛PH試紙(pH1-12) 1-12,顯色反應間隔1
80條/盒壬 98%
大鼠中性粒彈性蛋白(NE)聯免疫吸附測定試劑盒BOC-D-谷氨廣泛PH試紙(pH4-10) 4-10,顯色反應間隔1 80條/盒溴化鎳 99%
大鼠白介12 p40(IL-12/p40)聯免疫吸附測定試劑盒BOC-D-谷氨廣泛PH試紙(pH9-14) 9-14 80條/盒鈮粉 99.95% metals basis,325目
大鼠白介12(IL-12)聯免疫吸附測定試劑盒BOC-D-苯甘氨氟化鉛 AR,99.5% α-萘醌苯烷 90%
大鼠甘露糖結合蛋白/甘露糖結合凝集(MBP/MBL)聯免疫吸附測定試劑盒BOC-D-苯甘氨氟化鉛 SP1-萘 98%
大鼠水通道蛋白3(AQP-3)聯免疫吸附測定試劑盒BOC-D-苯甘氨醋鉛試紙 80條/盒,10盒/箱壬 分析標準品
大鼠水通道蛋白4(AQP-4)聯免疫吸附測定試劑盒BOC-L-苯甘氨氟硅鎂 CP,98.0%2,9-二-1,10-菲啰啉鹽鹽 99%
大鼠精氨(Arg)聯免疫吸附測定試劑盒BOC-L-苯甘氨氟化鎂 CP,95.0%1-萘酞 高純級
大鼠精氨加壓受體(Av pr1a)聯免疫吸附測定試劑盒BOC-L-苯甘氨4-肼 AR,≥98.0%1,2-萘醌-4-磺鈉鹽 98%
大鼠芳香烴受體(AhR)聯免疫吸附測定試劑盒BOC-L-異亮氨2,9-二-1,10-鄰菲洛啉 99.0%對壬 98%
sp185/HER-2 檢測試劑盒肌氨甲酯鹽鹽非受體酪氨蛋白激2抗體N-乙酰-L-苯氨
肌氨甲酯鹽鹽腫瘤壞死因子α誘導蛋白5N-乙酰-L-苯氨
肌氨甲酯鹽鹽腫瘤壞死因子C褪黑素
Tris,三羥甲基氨烷;氨丁三;緩血銨轉化生長因子β4抗體褪黑素
Tris,三羥甲基氨烷;氨丁三;緩血銨轉化生長因子β活化激結合蛋白1抗體褪黑素
Tris,三羥甲基氨烷;氨丁三;緩血銨硫氧還蛋白結合蛋白2抗體L-亮氨
N-(叔丁氧羰基)乙 MAPK調控蛋白TRB2抗體L-亮氨
N-(叔丁氧羰基)乙 ATP結合轉運因子2抗體L-亮氨
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