檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..需要而未提供

產品全稱：PYCARD 進口檢測試劑盒

英文名稱：Human PYCARD ELISA Kit

產品貨號：A097344

規格：48T/96T

服務：公司產品僅用于科研可提供免費代測服務，以及產品說明書和技術指導等

保存環境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標板,試劑,標準品等

試劑盒組成及試劑配制 ：

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

樣本實驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

（5）培養細胞

檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

非蛋白/游離巰基含量比色法定量檢測試劑盒20次鏈球菌B組探針法熒光定量PCR試劑盒

蛋白巰基/結合巰基含量比色法定量檢測試劑盒20次乙型肝炎病E型探針法熒光定量PCR試劑盒

總巰基含量熒光定量檢測試劑盒20次松鼠猴皰疹病探針法熒光定量PCR試劑盒

非蛋白/游離巰基含量熒光定量檢測試劑盒20次猿皰疹病探針法熒光定量PCR試劑盒

蛋白巰基/結合巰基含量熒光定量檢測試劑盒20次佩氏著色探針法熒光定量PCR試劑盒

通用型硝鹽含量比色法定量檢測試劑盒三代蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

通用型硝鹽含量熒光定量檢測試劑盒乙型肝炎病探針法熒光定量PCR試劑盒

通用型亞硝鹽比色法定量檢測試劑盒沿岸單孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

通用型亞硝鹽熒光定量檢測試劑盒20次流感嗜血桿菌型探針法熒光定量PCR試劑盒

通用型氮含量克爾道（Kjeldahl）法定量檢測試劑盒20次流感嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

肉類氮含量克爾道（Kjeldahl）法定量檢測試劑盒20次山羊痘病探針法熒光定量PCR試劑盒

飼料氮含量克爾道（Kjeldahl）法定量檢測試劑盒20次似血矛線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

谷類氮含量克爾道（Kjeldahl）法定量檢測試劑盒20次乙型肝炎病B型探針法熒光定量PCR試劑盒

土壤氮含量克爾道（Kjeldahl）法定量檢測試劑盒20次幽門螺旋桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

血液瓜氨含量比色法定量檢測試劑盒20次著色探針法熒光定量PCR試劑盒
PYCARD 進口檢測試劑盒6-糠基氨基,激動素磷化真核啟動因子2α抗體培養皿

dGTP溶液長鏈脂肪延長ELOVL2抗體培養皿

乙二雙(2-氨基乙基)四乙長鏈脂肪延長長ELOVL5抗體培養皿

乙二雙(2-氨基乙基)四乙有脊椎動物腦發育相關蛋白Emx1抗體培養皿

無水磷二氫鈉(分子學級)外胚層神經皮層蛋白1抗體分格培養皿

無水磷二氫鈉(分子學級)烯化超家族成員1抗體三格培養皿

pUCm-T載體核內焦磷/磷二酯1抗體PCR 板

pUCm-T載體內皮活化蛋白受體抗體PCR 板

操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。

（2）酶標板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。