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貨號 | A097515 |
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檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..需要而未提供
產品全稱:DES 進口檢測試劑盒
英文名稱:DES ELISA Kit
產品貨號:A097515
規格:48T/96T
服務:公司產品僅用于科研可提供免費代測服務,以及產品說明書和技術指導等
保存環境:2-8℃低溫、避光、防潮
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。 2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。 3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 4. 標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 6. 標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 |
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
側孢短芽孢桿菌人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)ELISA Kit,48T/96T 大鼠雙氫睪酮(DHT)
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米曲大鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA Kit,48T/96T 大鼠gp130
塔賓曲人激肽釋放11(KLK 11)ELISA Kit,48T/96T 大鼠粒-克隆激因子(G-CSF)
宇佐美曲大鼠白分化抗原44(CD44)ELISA Kit,48T/96T 大鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)
葡萄孢兔素(ADR)ELISA Kit,48T/96T 大鼠腫瘤壞死因子α (TNFα) ELISA KIT
金龜子綠僵菌小孢變種人神經生長導向因子Slit2 ELISA Kit,48T/96T 大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsRⅡ)
球孢白僵菌小鼠神經生長導向因子Slit2 ELISA Kit,48T/96T 大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體I(TNFsRI)
平沙綠僵菌人多巴D2受體(D2R)ELISA Kit,48T/96T 大鼠中性粒趨化蛋白-2(GCP-2)
平展米曲(米曲平展變種)大鼠多巴D2受體(D2R)ELISA Kit,48T/96T 大鼠Flt-3(Flt-3)
裂殖壺菌人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA Kit,48T/96T 大鼠Flt-3配體(Flt-3 ligand)
意大利青人Ⅲ(FⅢ)ELISA Kit,48T/96T 大鼠CCL1 ELISA kit
指狀青大鼠Ⅲ(FⅢ)ELISA Kit,48T/96T 大鼠 BTC ELISA Kit
DES 進口檢測試劑盒鹽氨啉(>99%,BP)糖皮質激素調節元件結合蛋白2抗體Lezol(總RNA提取試劑)
3-[N-(1,1-二甲基-2-基)]氨基-2-羥烷磺鈉鹽(>98%,BP)膠漿成熟因子γ/GMF-γ抗體Lezol(總RNA提取試劑)
3-[N-(1,1-二甲基-2-基)]氨基-2-羥烷磺鈉鹽(>98%,BP)谷氨酰轉移GMPS抗體DTT溶液(1mol/L,RNase free)
對甲氧基苯甲(>97%,BR)GDP甘露糖焦磷化B抗體EDTA溶液(0.5mol/L,pH8.0,RNase free)
三氧化二銻(>
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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