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貨號 | A097915 |
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檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..需要而未提供
產品全稱:UFC 檢測試劑盒
英文名稱:UFC ELISA Kit
產品貨號:A097915
規格:48T/96T
服務:公司產品僅用于科研可提供免費代測服務,以及產品說明書和技術指導等
保存環境:2-8℃低溫、避光、防潮
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。 2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。 3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 4. 標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 6. 標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 |
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
兔子前列腺E2(PGE2)檢測試劑盒肌激(CK)檢測試劑盒(肌比色法)Fmoc-O-芐-L-絲氨 98%雙草 分析標準品,99.3%
兔子前列腺E1(PGE1)檢測試劑盒淀粉(AMS)檢測試劑盒(-淀粉比色法)FMOC-O-叔丁-L-絲氨 98%多菌靈標準溶液 100μg/ml,u=3%
兔子前列腺E1(PGE1)檢測試劑盒淀粉(AMS)檢測試劑盒(-淀粉比色法)Fmoc-O-三苯-L-絲氨 98%多菌靈標準溶液 10μg/ml,u=3%
兔子皮質/上腺(CORT)檢測試劑盒α-淀粉(α-AMS)檢測試劑盒(硝水楊法)Fmoc-O-三苯-L-蘇氨 99% 分析標準品,98%
兔子皮質/上腺(CORT)檢測試劑盒酯(ChE)檢測試劑盒(羥三化鐵微板法)N-alpha-芴氧羰-N-in-叔丁氧羰-L-色氨 97.0%標準溶液 100μg/ml,u=3%,體:
兔子皮質(Cortisol)檢測試劑盒酯(ChE)檢測試劑盒(羥三化鐵比色法)Fmoc-L-酪氨 97%標準溶液 10μg/ml,u=4%
兔子皮質(Cortisol)檢測試劑盒酯(ChE)檢測試劑盒(羥三化鐵比色法)Fmoc-O-芐-L-酪氨 98%死蜱 分析標準品,99%
兔子腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)檢測試劑盒腺脫氨(ADA)檢測試劑盒(微板法)Fmoc-O-叔丁-L-酪氨 98%死蜱標準溶液 10μg/ml,u=6~3%,
兔子腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)檢測試劑盒腺脫氨(ADA)檢測試劑盒(比色法)Fmoc-O-叔丁-D-酪氨 99%死蜱標準溶液 100μg/ml,u=6~3%,
兔子內皮抑(ES)檢測試劑盒腺脫氨(ADA)檢測試劑盒(比色法)Fmoc-D-纈氨 98%高效氟菊酯 分析標準品,99%
兔子內皮抑(ES)檢測試劑盒脂肪(LPS)檢測試劑盒(比濁微板法)FMOC-L-氨五氟苯酯 98%高效氟菊酯標準溶液 100μg/ml,u=2%,體:石油
兔子內皮1(ET-1)檢測試劑盒脂肪(LPS)檢測試劑盒(比濁微板法)N-[(9H-芴-9-氧)羰]-D-氨五氟苯酯 98%高效氟菊酯標準溶液 10μg/ml,u=3%,體:石油
兔子內皮1(ET-1)檢測試劑盒脂肪(LPS)檢測試劑盒(比濁比色法)Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH 98%高效氟菊酯 分析標準品,96%
兔子免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒 單氧化(MAO)檢測試劑盒(苯腙比色法)N'-(4-氧-2,3,6-三磺酰)-D-精氨 98%氟菊酯標準溶液 100μg/ml,u=4%,體:正己烷
兔子免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒 單氧化(MAO)檢測試劑盒(苯腙比色法)N-Fmoc-N'-(均三苯-2-磺酰)-L-精氨 96%氟菊酯標準溶液 10μg/ml,u=5%,體:正己烷
兔子免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒5′-核(5′-NT)檢測試劑盒(鉬藍比色法)FMOC-L-天冬氨五氟苯酯 98.5%菊酯 分析標準品,97.5%
UFC 檢測試劑盒氟氯菊酯標準溶液(10μg/ml,u=5%,基體:正己烷)NDUFA9蛋白抗體
四螨(分析標準品,98.6%)間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體星孢菌素
四螨標準溶液(100μg/ml,u=4%)磷化間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體星孢菌素
四螨標準溶液(10μg/ml,u=6%)核仁和紡錘體相關蛋白1抗體三氯生
四聚乙(97%)心臟特異性同源盒轉錄因子NKX2.5抗體三氯生
四聚乙(97%)指(趾)關節粘連NOG蛋白抗體三氯生
氟菊酯標準溶液(100μg/ml,u=3%)核小體結合蛋白1抗體啶
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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