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貨號 | A097996 |
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產品全稱:AMH 檢測試劑盒
英文名稱:AMH ELISA kit
產品貨號:A097996
規格:48T/96T
服務:公司產品僅用于科研可提供免費代測服務,以及產品說明書和技術指導等
保存環境:2-8℃低溫、避光、防潮
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..需要而未提供
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。 2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。 3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 4. 標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 6. 標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 |
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
血管緊張原(AGT)聯免疫吸附測定試劑盒 4·1-66kDa低范圍分子量MARK 98%2-丁 99%
異體移植炎性因子1(AIF1)聯免疫吸附測定試劑盒 4·1-66kDa低范圍分子量MARK2--3-硝吡啶 >99.0% (HPLC)2-丁 99%, Kosher
雄激誘導蛋白1(AIG1)聯免疫吸附測定試劑盒 小分子量蛋白質標準三(五氟苯)烷 97%庚烯 98%
白活化黏附因子(ALCAM)聯免疫吸附測定試劑盒 SDS-PAGE蛋白質低分子量標準瓊脂粉 灰分ash ≤1.5%,High gel strength(1000-1200 g/cm2)2-丁2-丁酯 97%
線粒體乙脫氫(ALDM)聯免疫吸附測定試劑盒 SDS-PAGE蛋白質低分子量標準石油 AR,bp 90-120 °C2-丁2-丁酯 ≥97%, Kosher, FG
果糖二磷縮A(ALDOA)聯免疫吸附測定試劑盒 14·4-116kDa分子量MARK烯酯 98%二丁葉酯 98%
性鞘磷脂磷二酯(Alk-Smase)聯免疫吸附測定試劑盒 19-119kDa預先染色分子量MARK芐酯 96%異丁麥芽酯 98%
谷轉氨(ALT)聯免疫吸附測定試劑盒 SDS-PAGE蛋白質次高分子標準2-異 97%異丁麥芽酯 ≥98%, FG
抑制B(INHB)聯免疫吸附測定試劑盒SDS-PAGE蛋白質中分子量環戊 99%乙對芐酯 98%
周期依賴性激6(CDK6)聯免疫吸附測定試劑盒 SDS-PAGE蛋白質高分子量N,N-二苯酰 98%2-戊 ≥98%, FCC, FG
α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP/α1M)聯免疫吸附測定試劑盒 低范圍RNA Ladder異丁酯 98%4-戊 98%
周期依賴性激8(CDK8)聯免疫吸附測定試劑盒 高范圍RNA Ladder異酯 97%4-戊 ≥98%, FCC, FG
抗繆勒管激(AMH)聯免疫吸附測定試劑盒50bp DNA Ladder4-環己 98%4-乙烯愈瘡木 ≥98%,Kosher
磷化腺活化蛋白激(AMPK)聯免疫吸附測定試劑盒100bp DNA Ladder I-4-硝芐酯 97%乙辛酯 98%
唾液淀粉α1(AMY1)聯免疫吸附測定試劑盒 100bp DNA Ladder Ⅱ吡唑 99%乙辛酯 ≥98%, FCC, FG
胰淀(IAPP)聯免疫吸附測定試劑盒 1kb DNA LadderⅡ1,5-戊二 97%E-2-辛烯 95%
AMH 檢測試劑盒4'-羥基苯偶氮基-4-羧水合物(>98.0%(HPLC)(T))絲氨/蘇氨蛋白激18烯效唑
3-吲哚烯(>98.0%(HPLC)(T))表面受體PILRβ抗體聚肌
2',4',6'-三羥基苯乙酮一水合物(>98.0%(GC))孤兒核受體PAR1抗體聚胞
2',4',6'-三羥基苯乙酮一水合物(>98.0%(GC))多型性腺瘤基因1蛋白抗體聚腺
2-氨基苯甲酰(>98.0%(HPLC)(T))早幼粒白血病鋅指蛋白抗體聚尿
2-氨基苯甲酰(>98.0%(HPLC)(T))骨架蛋白C端PDLIM1抗體赤烯酮
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