TRITC標記鬼筆環肽注意事項和操作流程

2021年12月21日 16:49上海懋康生物科技有限公司點擊量：814

Phalloidin 鬼筆環肽；F-actin 肌動蛋白（聚合）；G-actin 球形肌動蛋白（單體）；Actin Polymerization 肌動蛋白聚合；Cytochalasin細胞松弛素；CAS NO.：17466-45-4；

產品信息

產品名稱	產品編號	規格	價格（元）
TRITC Phalloidin TRITC標記鬼筆環肽	MX4405-300T	300T	568
TRITC Phalloidin (Powder) TRITC標記鬼筆環肽	MX4406-1MG	1mg	4128

【溫馨提示】：見我司整理的鬼筆環肽及衍生物（Phalloidin and Phalloidin Conjugates）產品專題。

產品描述

鬼筆環肽（Phalloidin），又稱鬼筆鵝膏素，zui初是從毒蘑菇鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）中分離到的一種七肽毒素，以*的親和力和特異性結合肌動蛋白絲F-actin（聚合形式的肌動蛋白），不會結合單體肌動蛋白（G-actin）。不像肌動蛋白抗體，同時識別單體和聚合形式的肌動蛋白。鬼筆環肽對大小纖維的親和力相近，在許多不同的動植物物種的肌肉和非肌肉細胞中，基本都按照一個肌動蛋白亞基與一個鬼筆環肽分子的化學計量比結合。不像肌動蛋白抗體，對不同物種或來源的肌動蛋白親和力會發生明顯變化。鬼筆環肽的非特異性結合幾乎可忽略，染色和未染色區域的差異極其明顯。鬼筆環肽使得肌動蛋白聚合/解離的臨界濃度降至1μg/ml，可用作一種聚合增強劑。另外，產生的復合物高度穩定（解離常數約3×10^–8M），能夠抑制細胞松弛素、KI和溫度上升引起的去聚合和去組裝活性。

鬼筆環肽及其衍生物在納摩爾濃度即可對F-actin染色，且水溶性良好，是非常實用和方便的探針，對組織切片、細胞培養物或無細胞體系內的F-actin進行定性和定量研究。另外，鬼筆環肽及其衍生物很小，直徑約12–15 Å，分子量<2000 Da，經標記后的F-actin仍維持許多標記前的功能。比如，標記的甘油抽提肌纖維仍能收縮；標記的肌動蛋白絲仍能在固相肌球蛋白基質中移動。

本品為TRITC熒光標記的鬼筆環肽（TRITC-Phalloidin），以溶于甲醇的20µM儲存液形式提供，具體的工作濃度請參考文獻或自身實驗體系來調整，常用濃度范圍80-200nM。按照100nM的工作濃度來算，可進行300次細胞染色。

產品應用

1）對固定的組織切片和組織細胞培養物進行肌動蛋白絲（F-actin）的熒光染色；

2）體外制備穩定的熒光肌動蛋白絲（F-actin）；

注意事項

1）本品（Cat# MX4405）以溶于甲醇的儲存液（20µM）形式提供，300T包裝，適合用量少的研究者；另提供凍干粉形式（Cat# MX4406），1mg包裝，相對更經濟，適合用量多的研究者；

2）本品具有一定的毒性，LD₅₀=2mg/kg，操作時請注意防護。

3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

操作流程（免疫熒光染色）【詳見懋康整理】

有幾種方法都能用來染色組織細胞培養物內的肌動蛋白絲（F-actin）染色，其中，固定步驟在獲得可信且具代表性的細胞F-actin分布情況中至關重要。固定步驟基于實驗自身需求來選擇。多聚甲醛或戊二醛都能得到優秀的F-actin染色和良好的板狀偽足維持保存。

一、實驗材料準備

二、染色工作液準備

三、染色流程

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