小鼠多效生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒內(nèi)容 試驗(yàn)原理:
PTN試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知PTN濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將PTN和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PTN的濃度呈比例關(guān)系。
試劑盒內(nèi)容及其配制
小鼠多效生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒
試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制
96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型
塑料膜板蓋1塊半塊即用型
標(biāo)準(zhǔn)品:1600pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進(jìn)行稀稀
空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(4.0ml)1瓶(2.0ml)即用型
生物素標(biāo)記的抗PTN抗體1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
親和鏈酶素-HRP1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)即用型
洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進(jìn)行稀釋
底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型
標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型
自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性小鼠多效生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項(xiàng)
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
1600pg/ml(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
800pg/ml(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
400pg/ml(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
200pg/ml(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100pg/ml(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
50pg/ml(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0pg/ml(空白對(duì)照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。小鼠多效生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒
抗ENA抗體金標(biāo)法血清20T/40T
抗核抗體(ANA)金標(biāo)法血清20T/40T
抗ds-DNA抗體金標(biāo)法血清24T/48T
抗SS-DNA抗體金標(biāo)法血清20T/40T
抗SM抗體金標(biāo)法血清20T/40T
抗組蛋白抗體金標(biāo)法血清20T/40T
類風(fēng)濕因子(IgA\IgM\IgG)金標(biāo)法血清20T/40T
抗“O”試劑金標(biāo)法血清20T/40T
抗精子抗體(IgA\IgM\IgG)金標(biāo)法血清24T/48T
抗心磷脂抗體(IgA\IgM\IgG)金標(biāo)法血清24T/48T
抗子宮內(nèi)膜抗體(IgG\IgM)金標(biāo)法血清24T/48T
小鼠多效生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒