
2025年04月08日 08:25通派(上海)生物科技有限公司點擊量:33
細胞:HIT-T15細胞
中文名稱:倉鼠beta胰島β細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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干細胞有兩大類。一是胚胎干細胞,二是成年干細胞。
胚胎干細胞一直被視為有分化成全身各組織器官的能力,如心、肝、肺和腸;骨骼、血液和肌肉;皮膚、眼睛和神經系統等。而成年干細胞主要分布于骨髓、血液、大腦、胰腺等處,其作用有限。
1):固定性,如骨髓中的造血干細胞只是分化成各種血液細胞。
2):數量有限,較難分離和提純。
3):全能性低于胚胎干細胞,也就是說分化成各種類型的組織細胞的能力有限。
深入研究發現,盡管成年干細胞不如胚胎干細胞有全能性,但也具有像胚胎干細胞那樣潛在的全能分化能力,比如能分化出神經細胞和心肌細胞等。
因此在胚胎干細胞受到倫理限制后,研究人員的目光轉到成年干細胞上,試圖誘導成年干細胞定向、定型生長,以治療相應的疾病,比如修復心肌以治療心臟病。但是,大規模的臨床實踐證明,成年干細胞還是遜色不少,因而治病救人的重任還非胚胎干細胞莫屬。
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