1 M Tris-HCl (pH7.4，7.6，8.0)
組份濃度 1 M Tris-HCl
配制量 1L
配制方法 1.稱量121.1 g Tris置于l L燒杯中。
2.加入約800 ml的去離子水，充分攪拌溶解。
3.按下表加入濃HCl量調節所需要的pH值。
pH值 濃HCl
7.4 約70 ml
7.6 約60 ml
8.0 約42ml
4.將溶液定容至1 L。
5.高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：應使溶液冷卻至室溫后再調定pH值，因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高l℃，溶液的pH值大約降低0.03個單位。
1.5 M Tris-HCl (pH8.8)
組份濃度 1.5 MTris-HCl
配制量 1 L
配制方法 1.稱量181.7 g Tris置于1 L燒杯中。
2.加入約800 ml的去離子水，充分攪拌溶解。
3.用濃HCl調節pH值至8.8。
4.將溶液定容至1 L。
5.高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：應使溶液冷卻至室溫后再調定pH值，因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高l℃，溶液的pH值大約降低0.03個單位。
1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6，8.0)
組份濃度 100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA
配制量 1 L
配制方法 1.量取下列溶液，置于l L燒杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4，7.6，8.0) 100 ml
500 mM EDTA(pH8.0) 20 ml
2.向燒杯中加入約800 ml的去離子水，均勻混合。
3.將溶液定容至1 L后，高溫高壓滅菌。
4.室溫保存。
3 M醋酸鈉(pH5.2)
組份濃度 3 M醋酸鈉
配制量 100 ml
配制方法 1.稱量40.8 g NaOAc?3H2O置于100~200 ml燒杯中，加入約40 ml的去離子水攪拌溶解。
2.加入冰醋酸調節pH值至5.2。
3.加去離子水將溶液定容至100 ml。
4.高溫高壓滅菌后，室溫保存。
PBS Buffer
組份濃度 137 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4
配制量 1 L
配制方法 1.稱量下列試劑，置于l L燒杯中。
NaCl 8 g
KCl 0.2 g
Na2HPO4 1.42 g
KH2PO4 0.27 g
2.向燒杯中加入約800 ml的去離子水，充分攪拌溶解。
3.滴加濃HCl將pH值調節至7.4，然后加入去離子水將溶液定容至1 L。
4.高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：上述PBS Buffer中無二價陽離子，如需要，可在配方中補充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
10 M醋酸銨
組份濃度 10 M醋酸銨
配制量 100 ml
配制方法 1.稱量77.1 g醋酸銨置于100~200 ml燒杯中，加入約30 ml的去離子水攪拌溶解。
2.加去離子水將溶液定容至100 ml。
3.使用0.22 µm濾膜過濾除菌。
4.密封瓶，室溫保存。
注意：醋酸銨受熱易分解，所以不能高溫高壓滅菌。
Tris-HCl平衡
配制方法 1.使用原料：大多數市售液化是清亮無色的，無需重蒸餾便可用于分子生物學實驗。但有些液化呈粉紅色或黃色，應避免使用。同時也應避免使用結晶，結晶必須，160℃對其進行重蒸餾除去諸如醌等氧化產物，這些氧化產物可引起磷酸二酯鍵的斷裂或導致RNA和DNA的交聯等。因此，的質量對DNA、RNA的提取極為重要，我們推薦使用高質量的進行分子生物學實驗。
2.操作注意：腐蝕性，并可引起嚴重灼傷，操作時應戴手套及防護鏡等。所有操作均應在通風櫥中進行，與接觸過的皮膚部位應用大量水清洗，并用肥皂和水洗滌，忌用乙醇。
3.平衡：因為在酸性pH條件下DNA分配于有機相，因此使用前必須對進行平衡使其pH值達到7.8以上，平衡操作方法如下：
①液化應貯存于-20℃，此時的呈結晶狀態。從冰柜中取出的首先在室溫下放置使其達到室溫，然后在68℃水浴中使充分融解。
②加入羥基喹啉(8-Qulnollnol)至終濃度0.1%。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不抑制劑及金屬離子的弱螯合劑，同時因其呈黃色，有助于方便識別有機相。
③加入等體積的1 M Tris-HCl(pH8.0)，使用磁力攪拌器攪拌l5min，靜置使其充分分層后，除去上層水相。
④重復操作步驟③。
⑤加入等體積的0.1 M Tris-HCl(pH8.0)。使用磁力攪拌器攪拌l5min，靜置使其充分分層后，除去上層水相。
⑥重復操作步驟⑤，稍微殘留部分上層水相。
⑦使用pH試紙確認有機相的pH值大于7.8。
⑧將置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。
/氯仿/異戊醇
配制方法 l.說明：從核酸樣品中除去蛋白質時常常使用，氯仿/異戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白質變性并有助于液相與有機相的分離，而異戊醇則有助于消除抽提過程中出現的氣泡。
2.配制方法：將Tris-HCl平衡與等體積的氯仿/異戊醇(24:1)混合均勻后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。
10%(W/V)SDS
組份濃度 10%(W/V)SDS
配制量 100 ml
配制方法 1.稱量10 g高純度的SDS置于100~200 ml燒杯中，加入約80 ml的去離子水，68℃加熱溶解。
2.滴加濃HCl調節pH值至7.2。
3.將溶液定容至100 ml后，室溫保存。
2 N NaOH
組份濃度 2 N NaOH
配制量 100 ml
配制方法 1.量取80 ml去離子水置于100~200 ml塑料燒杯中(NaOH溶解過程中大量放熱，有可能使玻璃燒杯炸裂)。
2.稱取8 g NaOH小心地逐漸加入到燒杯中，邊加邊攪拌。
3.待NaOH溶解后，用去離子水將溶液定容至100 ml。
4.將溶液轉移至塑料容器中后，室溫保存。
2.5 N HCl
組份濃度 2.5 N HCl
配制量 100 ml
配制方法 1.在78.4 ml的去離子水中加入21.6 ml的濃HCl(11.6 N)，均勻混合。
2.室溫保存。
5 M NaCl
組份濃度 5 M NaCl
配制量 1 L
配制方法 1.稱量292.2 g NaCl置于1 L燒杯中，加入約800 ml的去離子水后攪拌溶解。
2加去離子水將溶液定容至1 L后，適量分成小份。
3.高溫高壓滅菌后，4℃保存。
20%(W/V)Glucose(葡萄糖)
組份濃度 20%(W/V)Glucose
配制量 100 ml
配制方法 1.稱取20 g Glucose置于100~200 ml燒杯中，加入約80 ml的去離子水后。攪拌溶解。
2.加去離子水將溶液定容至l 00 ml。
3.高溫高壓滅菌后，4℃保存。
Solution l (質粒提取用)
組份濃度 25 mM Tris-HCl(pH8.0)，10 mM EDTA，50 mM Glucose
配制量 1 L
配制方法 1.量取下列溶液，置于l L燒杯中。
1 M Tris-HCl(pH8.0) 25 m
0.5 M EDTA(pH8.0) 20 m
20% Glucose(1.11 M) 45 m
dH2O 910 m
2.高溫高壓滅菌后，4℃保存。
3.使用前每50 ml的Solution l中加入2 ml的RNase A(20 mg/ml)。
Solution Ⅱ(質粒提取用)
組份濃度 200 mM NaOH，1%(W/V)SDS
配制量 500 ml
配制方法 1.量取下列溶液，置于500 ml燒杯中。
10%SDS 50 ml
2NNa0H 50 ml
2.加滅菌水定容至500 ml，充分混勻。
3.室溫保存。此溶液保存時間不要超過一個月。
注意：SDS易產生氣泡，不要劇烈攪拌。
Sol ution Ⅲ(質粒提取用)
組份濃度 3 M KOAc，5 M Ethanoic acid (乙酸)
配制量 500 ml
配制方法 1.稱量下列試劑，置于500 ml燒杯中。
KOAc 147g
Ethanoic acid 57.5ml
2.加入300 ml去離子水后攪拌溶解。
3.加去離子水將溶液定容至500 ml。
4.高溫高壓滅菌后，4℃保存。
0.5 M EDTA (pH8.0)
組份濃度 0.5 M EDTA
配制量 1 L
配制方法 1.稱取186.1 g Na2EDTA?2H2O，置于1 L燒杯中。
2.加入約800 ml的去離子水，充分攪拌。
3.用NaOH調節pH值至8.0(約20gNaOH)。
注意：pH值至8.0時，EDTA才能溶解。
4加去離子水將溶液定容至1 L。
5.適量分成小份后，高溫高壓滅菌。
6.室溫保存。
1 M DTT
組份濃度 1 M DTT
配制量 20 ml
配制方法 1.稱取3.09 g DTT，加入到50 ml料離心管內。
2.加20 ml的0.01 M NaOAc(pH5.2)，溶解后使用0 22 µm濾膜過濾除菌。
3.適量分成小份后，-20℃保存。
10 mM ATP
組份濃度 10 mM ATP
配制量 20 mL
配制方法 1.稱取121 mg Na2ATP?3H2O，加入到50 ml塑料離心管內。
2. 加20 ml的25 mM Tris-HCl(pH8.0)，攪拌溶解。
3.適量分成小份后，-20℃保存。
蛋白質電泳相關試劑、緩沖液的配制方法
二、蛋白質電泳相關試劑、緩沖液的配制方法
30%(W/V)Acrylamide(丙烯酰胺)
組份濃度 30%(W/V)Acrylamide
配制量 1 L
配制方法 1.稱量下列試劑，置于l L燒杯中。
Acrylamide 290 g
BIS(雙丙烯酰胺) 10 g
2.向燒杯中加入約600 ml的去離子水，充分攪拌溶解。
3.加去離子水將溶液定容至l L，用0.45 µm濾膜濾去雜質。
4.于棕色瓶中4℃保存。
注意：丙烯酰胺具有很強的神經毒性，并可通過皮膚吸收，其作用具有積累性，配制時應戴手套等。聚丙烯酰胺無毒，但也應謹慎操作，因為有可能含有少量的未聚合成份。
40%(W/V)Acrylamide
組份濃度 40%(W/V)Acrylamide
配制量 1 L
配制方法 1.稱量下列試劑，置于l L燒杯中。
Acrylamide 380 g
BIS 20 g
2.向燒杯中加入約600 ml的去離子水，充分攪拌溶解。
3.加去離子水將溶液定容至l L，用0.45 µm濾膜濾去雜質。
4.于棕色瓶中4℃保存。
注意：丙烯酰胺具有很強的神經毒性，并可通過皮膚吸收，其作用具有積累性，配制時應戴手套等。聚丙烯酰胺無毒，但也應謹慎操作，因為有可能含有少量的未聚合成份。
10%(W/V) AP (過硫酸銨)
組份濃度 10%(W/V)AP
配制量 10 ml
配制方法 1.稱取1 g AP。
2.加入10 ml的去離子水后攪拌溶解。
3.貯存于4℃。
注意：1 0%過硫酸銨溶液在4℃保存時可使用2周左右，超過期限會失去催化作用。
5×Tris-Glyclne Buffer (SDS-PAGE電泳緩沖液)
組份濃度 0.125 M Tris，1.25 M Glyclne()，0.5%(W/V)SDS
配制量 1 L
配制方法 1.稱量下列試劑，置于l L燒杯中。
Tris 15.1 g
Glyclne 94 g
SDS 5.0 g
2.加入約800 ml的去離子水，攪拌溶解。
3.加去離子水將溶液定容至1 L后，室溫保存。
2×SDS -PAGE Loading Buffer
組份濃度
100 mM Tris-HCl(pH6.8)
100 mM β-巰基乙醇(2-ME)
4%(W/V) SDS
0.2%(W/V) 溴酚蘭(BPB)
20%(V/V) 甘油
配制量 5 ml
配制方法 1.量取下列試劑，置于10 ml塑料離心管中。
0.25 M Tris-HCl(pH6.8) 0.25 ml
β-巰基乙醇 0.5 ml
SDS 0.2 g
甘油 1 ml
1%溴酚蘭 0.1 ml，
2.加去離子水溶解后定容至5 ml。
3.小份(500 µl/份)分裝后，于室溫保存。
4.加入2-ME的Loading Buffer可在室溫下保存一個月左右
5×SDS-PAGE Loading Buffer
250 mM Tris-HCl(pH6.8)
10%(W/V) SDS
0.5%(W/V) BPB
50%(V/V) 甘油
5%(W/V) 2-ME
組份濃度
配制量 5 ml
配制方法 1.量取下列試劑，置于10 ml塑料離心管中。
1 M Tris-HCl(pH6.8) 1.25 ml
SDS 0.5 g
BPB 25 mg
甘油 2.5 ml
2.加去離子水溶解后定容至5 ml。
3.小份(500 µl/份)分裝后，于室溫保存。
4.使用前將25 µl的2-ME加到每小份中。
5.加入2-ME的Loading Buffer可在室溫下保存一個月左右。
考馬斯亮藍R-250染色液
組份濃度 0.1%(W/V)考馬斯亮藍R-250，25%(V/V)異丙醇，10%(V/V)冰醋酸
配制量 1 L
配制方法 1.稱取1 g考馬斯亮藍R-250，置于1 L燒杯中。
2.量取250 ml的異丙醇加入上述燒杯中，攪拌溶解。
3.加入100 ml的冰醋酸，攪拌均勻。
4.加入650 ml的去離子水，攪拌均勻。
5.用濾紙除去顆粒物質后，室溫保存。
考馬斯亮藍染色脫色液
組份濃度 10%(V/V) Ethanoic acid，30%(V/V)乙醇
配制量 1 L
配制方法 1.量取下列溶液，置于l L燒杯中。
Ethanoic acid 100 ml
乙醇 300 ml
dH2O 600 ml
2.充分混合后使用。
凝膠固定液(SDS-PAGE銀氨染色用)
組份濃度 50%(V/V)甲醇，10%(V/V) Ethanoic acid
配制量 100 ml
配制方法 1.量取下列試劑，加入100~200 ml的試劑瓶中。
甲醇 500 ml
Ethanoic acid 100 ml
dH2O 400 ml
2.均勻混合后室溫保存。
