常用的兔ELISA試劑盒背景問(wèn)題

2015年01月18日 21:45上海豐壽實(shí)業(yè)有限公司點(diǎn)擊量：464

如果您一直被兔ELISA試劑盒所困擾，那么也許您該花些時(shí)間來(lái)優(yōu)化封閉液。這可能需要時(shí)間，但也是值得的。目前主要有兩種類型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑。您使用的類型須取決于多個(gè)因素，包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、您的抗體和檢測(cè)試劑。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、兔ELISA試劑盒抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用。
zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定，在去除洗滌過(guò)程中的一些非特異結(jié)合上很有用。但它們只在存在時(shí)起作用，因?yàn)楹苋菀妆幌吹?。兔ELISA試劑盒因此所有洗滌液中也必須添加封閉液。請(qǐng)勿使用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%），它會(huì)降低特異結(jié)合，產(chǎn)生假陰性。另一個(gè)選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液，后者可協(xié)助洗滌過(guò)程中的封閉。

同時(shí)穩(wěn)定與微孔板結(jié)合的抗原分子。封閉液包括牛血清白蛋白（BSA）、兔ELISA試劑盒脫脂奶粉、正常血清和魚(yú)明膠。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不過(guò)，它的缺點(diǎn)在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。解決這個(gè)問(wèn)題的一種方法是使用雞或魚(yú)的正常血清。另一點(diǎn)也很顯而易見(jiàn)：切勿使用過(guò)多的檢測(cè)試劑。兔ELISA試劑盒如果濃度過(guò)高，或者未正確稀釋，則會(huì)導(dǎo)致高背景。也不要顯色過(guò)度，如有必要，優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)加入終止液。
如果您的兔ELISA試劑盒不幸地遇到了高背景，那么也無(wú)需太擔(dān)心，依次查看兔ELISA試劑盒系統(tǒng)中的組分，并排除可能存在的問(wèn)題。悉心優(yōu)化，相信很快就會(huì)有漂亮的結(jié)果。

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