【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

1.產品名稱：兔脂肪間充質干細胞操作步驟

2.組織來源：脂肪組織

3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

兔脂肪間充質干細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內皮功能、纖溶活動及炎癥反應，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內分泌系統。脂肪組織中也存在一些干細胞群，具有自我更新能力和多向分化潛能，被稱為脂肪組織來源的間充質干細胞，簡稱脂肪間充質干細胞。與骨髓間充質干細胞相比，在來源、細胞群特點以及分化潛能等多方面極為相似。但是，脂肪間充質干細胞更易獲得足夠數量的細胞，且獲取過程中對機體損傷更小，是更為理想的自體干細胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質干細胞以梭形為主要形態，BrdU可標記其細胞核。

本公司的兔脂肪間充質干細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經CD90/CD44、CD34/CD45免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5.培養基信息：

DMEM-F12、FBS、間充質干細胞生長添加劑、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。

Alexa Fluor 555標記的兔抗小鼠IgM ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide)
堿性磷酸酶（AP）標記的兔抗小鼠IgM Kir6.2 peptide
堿性磷酸酶（AP）標記的羊抗小鼠IgM AVPR2(arginine vasopressin receptor 2)
辣根過氧化物酶標記的兔抗豬IgG Aurora B
膠體金標記的兔抗豬IgG Nociceptin
PE標記的兔抗豬IgG B7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1)
PE-CY5標記的兔抗豬IgG Nociceptin receptor
PE-Cy7標記的兔抗豬IgG Nogo-A
*標記的兔抗豬IgG Nogo R
*標記的兔抗大鼠IgG Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter)
辣根過氧化物酶標記的小鼠抗兔IgM Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter)
PE-Cy7標記的小鼠抗兔IgG phospho-BAD(pSer128)
Alexa Fluor 555標記的小鼠抗兔IgG Bak(BCL2 homologous antagonist/killer)
Alexa Fluor 647標記的小鼠抗兔IgG NOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1)
Cy3標記的小鼠抗兔IgG NOS-2 (iNOS) Nitric Oxide Synthase,Inducible
PE-CY5標記的小鼠抗兔IgG Batroxobin
Cy5.5標記的小鼠抗兔IgG NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS
Alexa Fluor 350標記的小鼠抗兔IgG NPY ( Neuropeptide Y)
Alexa Fluor 488標記的小鼠抗兔IgG NR2B (Glutamate receptor)
Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠IgG NT-3
Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠IgG NT-4,NT-5
人N端中段骨鈣素   48T
LRP-6(Human low-density lipoprotein-receptor-related protein) ELISA Kit  人低密度脂蛋白受體相關蛋白6   48T
VLDLR(Human very low density lipoprotein receptor) ELISA Kit  人極低密度脂蛋白受體   48T
LDLR(Human very low density lipoprotein receptor) ELISA Kit  人低密度脂蛋白受體   48T
HDL(Human High density lipoprotein) ELISA Kit  人高密度脂蛋白   48T
Alpha-GST(Human Alpha-glutathione S-transferases) ELISA Kit  人α*S轉移酶   48T
GSH-Px kit(human)  人*過氧化物酶elisa試劑盒   96T
Hcy(Human Homocysteic acid) ELISA Kit  人同型半*   48T
FFA(Human free fatty acids) ELISA Kit  人游離脂肪酸   48T
ON(Human osteonectin) ELISA Kit  人骨粘連蛋白   48T
FA(Human Folic acid) ELISA Kit  人*   96T
ET(Human endotoxin) ELISA Kit  人內毒素   48T
PPAR- Gamma(Human Peroxisome Proliferator-activated receptor Gamma) ELISA Kit  人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ   48T
CsA(Human Cyclosporine A) ELISA Kit  人*A   48T
GFAP(Human glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit  人神經膠質纖維酸性蛋白   48T
15-LO/LOX(Human 15-lipoxygenase) ELISA Kit  人15脂加氧酶   48T
CETP(Human glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit  人*酯轉移蛋白   48T
LTC4(Human Leukotriene C4) ELISA Kit  人白三烯C4   48T
Cyt-C(Human Cytochrome-C) ELISA Kit  人*   48T
LPL(Human lipoprotein lipase) ELISA Kit  人脂蛋白脂酶   48T
GP-II(Human Glycogen phosphorylase II) ELISA Kit  人糖原磷酸化酶同工酶II   48T
GP-MM(Human Glycogen phosphorylase MM) ELISA Kit  人糖原磷酸化酶同工酶MM   48T
GP-BB(Human Glycogen phosphorylase BB) ELISA Kit  人糖原磷酸化酶同工酶BB   48T
Lp- Alpha(Human lipoprotein Alpha) ELISA Kit  人脂蛋白α   48T
Cr(Human Crosslaps) ELISA Kit  人骨膠原交聯   48T
C I CP(Human cross-linked C-opeptides of Type I collagen) ELISA Kit  人Ⅰ型前膠原C末端