1.產(chǎn)品名稱：兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法
2.組織來(lái)源：主動(dòng)脈組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞分離自主動(dòng)脈組織；主動(dòng)脈是體循環(huán)的動(dòng)脈主干。其運(yùn)行路徑為：升主動(dòng)脈起于左心室，至右側(cè)第2胸肋關(guān)節(jié)高度移行為主動(dòng)脈弓，弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動(dòng)脈；在第12胸椎體高度穿膈的主動(dòng)脈裂孔移行為腹主動(dòng)脈，以上為胸主動(dòng)脈，至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動(dòng)脈；髂總動(dòng)脈在骶髂關(guān)節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動(dòng)脈。主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞在心血管疾病發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用，以主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象，探討心血管疾病相關(guān)發(fā)病機(jī)制是目前研究的熱點(diǎn)；體外培養(yǎng)的主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
本公司的兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞采用*-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM[H]、FBS、平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
| 細(xì)胞名稱 | 兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法 |
| 規(guī)格 | 5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
| 價(jià)格 | 來(lái)電可享受優(yōu)惠 |
優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類(lèi)齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買(mǎi)本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問(wèn)題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過(guò)五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過(guò)一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
膠體金標(biāo)記的羊抗人IgG IRS-1
FITC標(biāo)記的兔抗人IgG AQP3(aquaporin 3)
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗馬IgM IRS-2
Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgG AQP1(Aquaporin1)
Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgG IRS-3
PE標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 IRS-4
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記兔抗人IgA IRS P53 (Insulin receptor substrate P53)(多肽)
*標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 PGE2 peptide
*標(biāo)記的兔抗人IgG Integrin Beta chain (ITG- Beta3/ITGB3)
*標(biāo)記的小鼠抗人IgG AQP9(aquaporin Protein-9)
*標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA Leptin
*標(biāo)記的羊抗人IgM Leptin receptor(long)
Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗人IgG phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580)peptide
PE-CY5標(biāo)記的兔抗人IgG MAPK-1/2
PE標(biāo)記的小鼠抗人IgG MAPKK2
Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗人IgG M2-PK ( pyruvate Kinase M2)
*標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG M2-PK ( pyruvate Kinase M2 )
PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc p-Arhgef2/GEF-H1(Rho guanine nucleotide exchange factor 2,pSer810)
PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc Melan-A/MART-1
PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc ARIP2a(Activin receptor 2A)
PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc Beta-arrestin 1/2(beta-arrestin 1/2)
*標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 ARIP2B(Activin receptor 2B)
Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗猴IgM MTR-1A (Melatonin receptor-1A)
PE標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱：MYC
PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 N-coR1 (Nuclear receptor co-repressor 1)
48T
PPAR- Alpha(Human peroxisome proliferators activator receptors alpha) ELISA Kit 人過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α 48T
Apo-E(Human Apolipoprotein E) ELISA Kit 人載脂蛋白E 48T
OGP(Human Osteogenic Growth Peptide) ELISA Kit 人成骨生長(zhǎng)肽 48T
ODF(Human osteoclast differentiation factor) ELISA Kit 人破骨細(xì)胞分化因子 48T
OH-PYD(Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks) ELISA Kit 人羥基膠原吡啶交聯(lián) 48T
DPD(Human Deoxypyridinoline crosslinks) ELISA Kit 人脫氧膠原吡啶交聯(lián) 48T
PYD(Human Pyridinoline crosslinks) ELISA Kit 人膠原吡啶交聯(lián) 48T
SPA(Human Staphylococal protein A) ELISA Kit 人葡萄球菌蛋白A 48T
ConA(Human concanavalin A) ELISA Kit 人刀豆素A 48T
FEP(Human Free erythrocyte proloporphyrin) ELISA Kit 人游離原卟啉 48T
LBP(Human lipolysaccharide binding protein) ELISA Kit 人脂多糖結(jié)合蛋白 48T
GSH-Px(Human Glutathione peroxidase) ELISA Kit 人*過(guò)氧化酶 48T
GSH(Human glutathione) ELISA Kit 人* 48T
17-KS(Human 17-ketosteroids) ELISA Kit 人17-酮類(lèi)固醇 48T
17-OHCS(Human 17-Hydroxycorticosteroids) ELISA Kit 人17羥皮質(zhì)類(lèi)固醇 48T
cath-K(Human Cathepsin K) ELISA Kit 人組織蛋白酶K 48T
BMPs(Human bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 人骨形成蛋白 48T
RBP-4(Human Retinol binding protein 4) ELISA Kit 人*結(jié)合蛋白4 48T
