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細胞凍存主要操作步驟2024/6/12
細胞凍存主要操作步驟：1、選擇處于對數生長期的細胞，在凍存前一天*換液。將多個培養瓶中的細胞培養液去掉，用0.25%yi蛋白酶消化。適時去掉yi蛋白酶，加入少量新培養液。用吸管吸取培養液反復吹打瓶壁上...
RT-PCR實驗提高逆轉錄保溫溫度方法2024/6/3
較高的保溫溫度有助于RNA二級結構的打開，增加了反應的產量。對于多數RNA模板，在沒有緩沖液或鹽的條件下，將RNA和引物在65℃保溫，然后迅速置于冰上冷卻，可以消除大多數二級結構，從而使引物可以結合。...
熒光定量PCR試劑盒反應特異性提高的方法2024/5/27
熒光定量PCR試劑盒反應特異性提高的方法：1.引物的設計引物最好在模板cDNA的保守區設計，長度15-30bp，GC含量小于60%，3’端不超過連續三個G或C，堿基分布錯落有致，避免引物自身形成二聚體...
抗原抗體反應特性說明2024/5/20
抗原抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發生的特異性結合反應。這種反應既可在機體內進行，也可以在機體外進行。在機體內，當免疫細胞被抗原激活后，由B細胞分化成熟為漿細胞后所合成、分泌的一類能與相應抗原特異性...
ELISA測定實驗條件闡述2024/5/13
ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。ELISA實驗檢測具備條件闡述：1...
逆轉錄-聚合酶鏈反應 （RT-PCR） 實驗方法原理2024/5/6
逆轉錄-聚合酶鏈反應（ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction,RT-PCR）的原理是：提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用Oli...
ELISA試驗手工洗滌操作過程2024/4/28
洗滌在ELISA試驗過程中雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA試驗就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質，以及在反...
細胞傳代問題分析2024/4/22
細胞傳代問題分析：1、傳代密度過高一旦細胞養太久至融合度過高(90%)才傳代，容易使細胞產生老化現象，甚至是堆疊，再消化細胞時不易吹打成單顆細胞，即便再重新鋪盤傳代，細胞也無法回到原本的特性了。(如：...
大鼠肺動脈內皮細胞培養實驗步驟2024/4/15
大鼠肺動脈內皮細胞培養實驗步驟：1、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。2、在超凈工作臺中，將大鼠斷頭置于玻璃培養皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻...
常見的PCR反應淺析2024/4/8
常見的PCR反應淺析如下：1、常規PCR：直接PCR是指直接從樣品擴增目標DNA，無需進行核酸分離純化。2、熱啟動PCR：熱啟動PCR常用于增強PCR擴增的特異性。該方法主要利用抗體、親合配體、適體或...
腸球菌通用PCR檢測試劑盒實驗步驟2024/3/29
腸球菌通用PCR檢測試劑盒實驗步驟：1、產品僅用于科研取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其全溶解。2、兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振...
標準物質的五大特性類2024/3/25
標準物質的特性分為五大類：1、化學成分類：標準物質，純的化合物或是有代表性的基體樣品，天然的或添加(被)分析物的(如，用作農藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動物脂肪)，以一種或多種化學或物理化學特性值表征。...
ELISA試驗避免血清沉積方法2024/3/18
ELISA試驗避免血清沉積方法：1、凍結血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，削減沉積的發作。2、血清分裝凍存時，須規矩搖晃均勻（當心勿形成氣泡），使溫度與成分均一。3、勿直接由-20℃直接至...
小鼠ELISA試劑盒結果的判定2024/3/11
小鼠ELISA試劑盒結果的判定：1、結果的判定嚴格依據試劑盒提供的陽性判定值（CO）進行結果判定。廠商提供試劑的同時，說明書上列出的CO值是建立在一系列科學試驗及統計研究的基礎上，不應隨意更改。定量測...
冷凍細胞活化具體過程2024/3/4
冷凍細胞之活化原則為快速解凍，以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害，導致細胞之死亡。細胞活化后，約需數日，或繼代一至二代，其細胞生長或特性表現才會恢復正常(例如產生單株抗體或是其它蛋白質)。收到細胞株包...
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