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ELISA試驗(yàn)復(fù)孔CV大標(biāo)曲異常的原因及對(duì)策:
可能原因:
1、液體量取體積不一致,使用前未混勻離心取上清;
2、邊緣效應(yīng):恒溫箱溫度并不全恒溫,可能會(huì)由于貼近箱壁,導(dǎo)致部分板條溫度稍高;
3、 酶標(biāo)板中液體有氣泡,氣泡會(huì)阻礙孵育時(shí)抗原抗體結(jié)合,讀數(shù)時(shí)有氣泡,會(huì)改變液體透光率;上機(jī)讀數(shù)時(shí),酶標(biāo)板底有指紋或液體;
4、酶標(biāo)儀未提前開(kāi)機(jī)預(yù)熱,讀值不穩(wěn)定。
建議:
1、 標(biāo)準(zhǔn)品加樣時(shí),可以單槍頭從低濃度到高濃度垂直懸空添加,不換槍頭,避免槍頭誤差;
2、 孵育時(shí),酶標(biāo)板請(qǐng)勿堆疊,或放在貼近出風(fēng)口和箱壁處;
3、 離心管中有氣泡,可通過(guò)低速離心去除;采用反向移液,槍頭在液面下第二擋吸入液體,第一擋推出液體,適用于有一定粘度和有泡沫的液體操作;
4、 酶標(biāo)儀提前15分鐘預(yù)熱;上機(jī)讀數(shù)前使用無(wú)塵布輕輕擦凈板底。
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