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細(xì)胞株操作要點(diǎn)

2017年11月22日 16:15上海邦景實(shí)業(yè)有限公司點(diǎn)擊量:576

細(xì)胞株操作方法及步驟:
操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
120ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
60ng/L 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30ng/L 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15ng/L 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
7.5ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
操作要點(diǎn)
1.仔細(xì)閱讀說明書,確定胰島素ELISA試劑盒在有效期內(nèi)。按說明書確定所有試劑齊全,以及所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等。
2.標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存。
3.按胰島素ELISA試劑盒說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑。
4.選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對。若選擇兩個(gè)單抗,必須識(shí)別不同表位的抗體,從同一家公司選擇抗體。
5.一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標(biāo)準(zhǔn)的Elsia操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
細(xì)胞株HUVSMC tRNA    人臍靜脈平滑肌細(xì)胞總RNA    10 µg
HUASMC tRNA    人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞總RNA    10 µg
HBMEC miRNA    人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HBCSMC miRNA    人腦血管平滑肌細(xì)胞微小RNA    1 µg
HBVP miRNA    人腦血管周細(xì)胞微小RNA    1 µg
HCPEC miRNA    人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HCPEpiC miRNA    人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HCPF miRNA    人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞微小RNA    1 µg
HMC miRNA    人腦膜細(xì)胞微小RNA    1 µg
HN miRNA    人神經(jīng)元微小RNA    1 µg
HCGC miRNA    人小腦顆粒細(xì)胞微小RNA    1 µg
HN-h miRNA    人海馬趾神經(jīng)元微小RNA    1 µg
HOPC miRNA    人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞微小RNA    1 µg
HOPC-os miRNA    人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-懸浮生長微小RNA    1 µg
HSC miRNA    人雪旺細(xì)胞微小RNA    1 µg
HPC miRNA    人神經(jīng)束膜細(xì)胞微小RNA    1 µg
HA miRNA    人星形膠質(zhì)細(xì)胞微小RNA    1 µg
HA-c miRNA    人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞微小RNA    1 µg
HA-sp miRNA    人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞微小RNA    1 µg
HA-h miRNA    人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞微小RNA    1 µg
HM miRNA    人小膠質(zhì)細(xì)胞微小RNA    1 µg
HDMEC miRNA    人微血管內(nèi)皮細(xì)胞微小RNA    1 µg
HDLEC miRNA    人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞微小RNA    1 µg細(xì)胞株

 

 

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